[發明專利]利用紅細胞內含有的血紅蛋白的本征色素沉著來確定血樣的血細胞比容的方法及設備

有效

• 申請號: 200980116632.1
• 申請日: 2009-03-20
• 公開（公告）號: CN102016578A
• 公開（公告）日: 2011-04-13
• 發明（設計）人: 羅伯特·A·萊文;斯蒂芬·C·沃德洛;達瑞恩·W·溫弗里希特;尼滕·V·拉爾普里亞
• 申請（專利權）人: 艾博特健康公司
• 主分類號: G01N33/49
• 分類號: G01N33/49
• 代理公司: 北京天昊聯合知識產權代理有限公司 11112
• 代理人: 陳源;張天舒

本申請要求以下美國臨時專利申請的優先權：2008年3月21日提交的No.61/038,557和2008年3月21日提交的No.61/038,574，這些臨時專利申請在此以引文方式整體并入本申請。

技術領域

本發明總的來說涉及分析血樣的設備及方法，具體地講，涉及確定血液樣本的血細胞比容的設備及方法。

背景技術

內科醫生、獸醫和科學家檢查人類和動物的生物流體(尤其是血液)，以確定組分的微粒數量以及識別是否存在在健康的受試者中沒有發現的異常微粒。通常被測量、定量和識別的微粒包括紅細胞(RBC)、白細胞(WBC)和血小板。RBC分析包括確定RBC數目、大小、體積、形狀、血紅蛋白含量和濃度、以及血細胞比容(也被稱為紅細胞壓積)。RBC分析還可以包括確定紅細胞(諸如DNA，RNA)內是否存在某些成分和/或確定這些成分的濃度，包括檢測RBC中是否存在和/或存在多少血液寄生蟲(例如瘧原蟲)或者檢測WBC中是否存在和/或存在多少細胞外的或利什曼原蟲組織的睡病蟲，以及檢測是否存在和/或存在多少其他血液寄生蟲。WBC分析可以包括確定WBC子類型的族群(population)頻率，通常稱為分類WBC計數，以及通知任何在健康的受試者中沒有發現的異常細胞類型。血小板(或者在包括鳥、爬行動物和魚的某些動物中為凝血細胞(thrombocyte)，該凝血細胞在功能上類似于哺乳動物的血小板，但是比哺乳動物的血小板大約10倍且是有核的)分析可以包括對血小板數目、大小、形狀結構和體積的確定，包括確定樣本中是否存在血小板或凝血細胞的凝塊。

在諸如Wintrobe’s?Clinical?Hematology第12版的醫學文獻中詳細描述的已知的血液檢查技術通常將檢查方法分為手動、離心和阻抗型方法。用于細胞計數的手動方法通常涉及產生精確確定的血液或流體樣本的體積，該血液或流體樣本被定量稀釋并且在計數室中被直觀計數。手動檢查方法包括檢查其中通過目測確定微粒類型的相對量的外周涂片。離心檢查方法涉及對樣本進行離心，使得根據組分的相對密度將樣本分成多個組分層。可以給每個組分層染色，以增強可見性或檢測性。阻抗型方法涉及根據被測量的微粒檢查被處理血液的精確體積；例如溶解RBC來計數有核細胞以及在導電流體中體積地(volumetrically)稀釋樣本。該過程通常涉及監視施加給通過窄通道的樣本的電流或電壓，以確定當微粒以單行通過時微粒對電流/電壓的影響。其他技術涉及對通過光束入射到以單行通過的微粒的光的強度和散射角的分析。還可以使用流式細胞測定法，該方法涉及利用熒光基團給懸浮中的感興趣的微粒染色、用適當波長的光激發染色微粒、以及分析各個微粒/細胞的發光(emission)。

除了外周涂片或離心分離之外，上述所有方法都要求滴涂精確的樣本體積。樣本體積的不精確將導致相關分析中同一數量的定量誤差。除了離心方法之外，上述所有方法還都要求樣本與一種或多種液體試劑或稀釋劑混合，并且為了獲得精確的結果還要求對儀器進行校準。在外周涂片的情況下，需要高度訓練來正確地檢查涂片。上述的許多方法產生大量的污染物，而處理這些污染物是昂貴的。另外，上述方法不適于確定其中紅細胞尺寸非常小的鳥、爬行動物、魚和某些哺乳動物中的全血計數(CBC)。

盡管從全血計數獲得的復雜的血液信息量，但是通常仍然需要一個測試：血細胞比容。血細胞比容可告訴內科醫生患者是否是由于流血或者營養原因(例如在處于生長階段的孩子和生育年齡的婦女中相對常見的鐵缺乏)、相關病情(例如慢性感染)、代謝疾病(例如尿毒癥或者腫瘤疾病)以及藥物影響導致的貧血。血細胞比容升高表示由于諸如其中血液被濃縮的脫水之類的病情導致的存在太多的紅細胞。血細胞比容升高還可以表示紅細胞質量的實際增大，這種情況出現的原因在于諸如紅細胞增多癥之類的病情、或者諸如服用過多合成類固醇之類的藥物影響或者由于肺部疾病或者某些類型的先天性心臟病導致的慢性缺氧。血細胞比容的重要性和實用性使其成為被最頻繁要求的對血液進行的測試之一。因此，容易的、準確的、便宜的以及能夠快速獲得的血細胞比容的確定是非常期望的，并且將對患者有益。一種儀器，其可以使用一次性分析腔室，除了毛細管流動之外可以不使用任何內部流體(即，與重力和方位無關)，以及可以用作手持式設備，這種儀器是非常有用的。

發明內容