[發明專利]β-淀粉酶、編碼其的基因和其制造方法

有效

• 申請號: 200980116459.5
• 申請日: 2009-04-21
• 公開（公告）號: CN102016033A
• 公開（公告）日: 2011-04-13
• 發明（設計）人: 松永亞希子;天野仁;山口莊太郎
• 申請（專利權）人: 天野酶株式會社
• 主分類號: C12N15/09
• 分類號: C12N15/09;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N9/26;C12P19/12;C12P19/22
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 苗堃;金世煜

1.彎曲芽孢桿菌來源的β-淀粉酶。

2.具有下述酶化學性質的β-淀粉酶：

(1)作用：作用于多糖類和寡糖類的α-1，4糖苷鍵，將麥芽糖游離；

(2)底物特異性：良好地作用于淀粉、直鏈淀粉、支鏈淀粉、糖原、麥芽四糖、麥芽戊糖、麥芽己糖、麥芽庚糖，而不作用于普魯蘭多糖、葡聚糖、環糊精、麥芽三糖；

(3)最適溫度：約55℃；

(4)最適pH：約8.0；

(5)溫度穩定性：在55℃以下穩定(pH?5.0、10分鐘)；

(6)pH穩定性：在pH?4～9穩定(30℃、3小時)；

(7)分子量：約60000(SDS-PAGE)。

3.具有序列號7中所示的氨基酸序列、或與該氨基酸序列等價的氨基酸序列的β-淀粉酶。

4.根據權利要求3所述的β-淀粉酶，所述等價的氨基酸序列是與序列號7中所示的氨基酸序列90％以上相同的氨基酸序列。

5.以權利要求1～4中任一項所述的β-淀粉酶作為有效成分的酶劑。

6.由選自以下(A)～(C)中任一項的DNA構成的β-淀粉酶基因：

(A)編碼序列號7中所示的氨基酸序列的DNA；

(B)由序列號6中所示的堿基序列構成的DNA；

(C)具有與序列號6中所示的堿基序列等價的堿基序列，且編碼具有β-淀粉酶活性的蛋白質的DNA。

7.含有權利要求6所述的β-淀粉酶基因的重組載體。

8.導入有權利要求6所述的β-淀粉酶基因的轉化體。

9.β-淀粉酶的制造方法，其包括以下步驟(1)和(2)、或步驟(i)和(ii)：

(1)培養具有β-淀粉酶產生能力的彎曲芽孢桿菌的步驟，

(2)從培養后的培養液和/或菌體回收β-淀粉酶的步驟；

(i)在產生所述基因編碼的蛋白質的條件下培養權利要求8所述的轉化體的步驟，

(ii)回收產生的所述蛋白質的步驟。

10.根據權利要求9所述的制造方法，所述彎曲芽孢桿菌是保藏編號為NITE?BP-548的特定菌株。

11.保藏編號為NITE?BP-548的特定彎曲芽孢桿菌株。

12.麥芽糖的生成方法，其特征在于，使彎曲芽孢桿菌來源的β-淀粉酶作用于以葡萄糖的α-1，4鍵作為主鏈的多糖或寡糖。

13.根據權利要求12所述的生成方法，所述β-淀粉酶是權利要求2～4中任一項所述的β-淀粉酶。