[發(fā)明專利]雙靶生物傳感器細胞試驗無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200980115574.0 | 申請日： | 2009-03-04 |
| 公開（公告）號： | CN102037357A | 公開（公告）日： | 2011-04-27 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | T·A·邦奇;方曄;E·特蘭 | 申請（專利權(quán)）人： | 康寧股份有限公司 |
| 主分類號： | G01N33/50 | 分類號： | G01N33/50;C12Q1/02;G01N33/543;G01N33/74;G01N33/566 |
| 代理公司： | 上海專利商標事務(wù)所有限公司 31100 | 代理人： | 項丹;崔佳佳 |
| 地址： | 美國*** | 國省代碼： | 美國;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 生物 傳感器 細胞 試驗 | ||
1.一種不用標記的的篩選方法，包括：
提供生物傳感器，在該生物傳感器的表面上固定有活細胞，所述活細胞含有至少兩種不同靶標；
使固定的細胞與候選配體接觸；
使經(jīng)過候選配體處理的細胞與含有兩種標記的混合物接觸；和
測定候選配體對標記混合物誘導(dǎo)的生物傳感器輸出的作用。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述至少兩種不同靶標包括用生物傳感器彼此區(qū)分的第一靶標和第二靶標。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述各標記可選擇性調(diào)節(jié)不同靶標之一的活性。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述候選配體包括化學化合物、生物學分子、肽、蛋白質(zhì)、生物學樣品、候選小分子藥物、候選生物學分子藥物或候選小分子藥物-生物學偶聯(lián)物中的至少一種。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述靶標包括受體或細胞蛋白質(zhì)中的至少一種。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述受體包括Gq-偶聯(lián)受體、Gs-偶聯(lián)受體、Gi-偶聯(lián)受體、G12/13-偶聯(lián)受體、受體酪氨酸激酶、離子通道、鈉-質(zhì)子交換蛋白、整聯(lián)蛋白受體、轉(zhuǎn)運蛋白中的至少一種。
7.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述細胞蛋白質(zhì)包括細胞酶、細胞激酶或細胞結(jié)構(gòu)蛋白中的至少一種。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述標記包括激動劑、部分激動劑或反激動劑中的至少一種，所述激動劑活化靶標產(chǎn)生可檢測的生物傳感器輸出信號。
9.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述標記包括抑制劑或抗體中的至少一種，所述標記活化靶標產(chǎn)生可檢測的生物傳感器輸出信號。
10.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述各標記特異性調(diào)節(jié)不同靶標的活性。
11.如權(quán)利要求10所述的方法，其特征在于，所述靶標包括以下至少一種：一對Gq-偶聯(lián)受體、一對Gq-偶聯(lián)受體和Gs-偶聯(lián)受體、一對Gi-偶聯(lián)受體和Gs-偶聯(lián)受體、一對G蛋白-偶聯(lián)受體和受體-酪氨酸激酶，或一對受體和細胞蛋白質(zhì)。
12.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述候選配體對生物傳感器輸出的作用包括調(diào)節(jié)所述標記誘導(dǎo)的信號反應(yīng)。
13.如權(quán)利要求12所述的方法，其特征在于，所述調(diào)節(jié)包括改變信號幅度、動力學、動態(tài)學或它們的組合。
14.一種不用標記的篩選方法，包括：
提供生物傳感器，在該生物傳感器的表面上固定有活細胞，所述活細胞含有至少兩種不同靶標；
使固定的細胞與兩種標記的混合物接觸；
使經(jīng)過標記混合物處理的固定的細胞與候選配體接觸一段時間；和
測定所述標記對候選配體誘導(dǎo)的生物傳感器輸出的作用。
15.如權(quán)利要求14所述的方法，其特征在于，所述至少兩種不同靶標包括用生物傳感器彼此區(qū)分的第一靶標和第二靶標。
16.一種不用標記的篩選方法，包括：
提供生物傳感器，在該生物傳感器的表面上固定有活細胞，所述活細胞含有至少兩種不同靶標；
使固定的細胞與含至少一種阻斷劑的溶液接觸；
使固定的細胞與候選配體接觸；
使經(jīng)過候選配體處理的細胞與含有兩種標記的混合物接觸；和
測定候選配體對所述標記混合物誘導(dǎo)的生物傳感器輸出的作用。
17.如權(quán)利要求16所述的方法，其特征在于，所述阻斷劑包括細胞蛋白質(zhì)的拮抗劑、抑制劑、干擾性RNA、反義核酸或抑制性抗體中的至少一種，所述細胞蛋白質(zhì)不是所述標記的靶標，但其活化干擾生物傳感器對靶標的反應(yīng)。
18.如權(quán)利要求16所述的方法，其特征在于，加入所述阻斷劑后再加入候選配體。
19.如權(quán)利要求16所述的方法，其特征在于，所述阻斷劑與候選配體一起加入。
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