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[發(fā)明專利]發(fā)酵戊糖的細(xì)胞無(wú)效

專利信息
申請(qǐng)?zhí)枺?/td> 200980108009.1 申請(qǐng)日: 2009-03-05
公開(kāi)(公告)號(hào): CN101965400A 公開(kāi)(公告)日: 2011-02-02
發(fā)明(設(shè)計(jì))人: 保羅·克萊斯森;簡(jiǎn)·米特斯卡·拉恩·范德;比安卡·伊麗莎白·瑪麗亞·吉勒森;吉斯博蒂娜·皮特奈拉·蘇勒庫(kù)姆·范 申請(qǐng)(專利權(quán))人: 帝斯曼知識(shí)產(chǎn)權(quán)資產(chǎn)管理有限公司
主分類號(hào): C12N9/92 分類號(hào): C12N9/92;C12P7/10;C12N15/52
代理公司: 北京東方億思知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11258 代理人: 肖善強(qiáng);南霆
地址: 荷蘭*** 國(guó)省代碼: 荷蘭;NL
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摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 發(fā)酵 戊糖 細(xì)胞
【權(quán)利要求書(shū)】:

1.包含編碼木糖異構(gòu)酶的核苷酸序列的細(xì)胞,其中所述木糖異構(gòu)酶的氨基酸序列與SEQ?ID?NO:3中公開(kāi)的氨基酸序列具有至少約70%的序列同一性,并且其中所述核苷酸序列對(duì)所述宿主來(lái)說(shuō)是異源的。

2.根據(jù)權(quán)利要求1的細(xì)胞,其為真核細(xì)胞。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的細(xì)胞,其為酵母細(xì)胞。

4.根據(jù)權(quán)利要求3的細(xì)胞,其為Saccharomyces、Kluyveromyces、Candida、Pichia、Schizosaccharomyces、Hansenula、Klockera、Schwanniomyces或Yarrowia屬的酵母細(xì)胞。、

5.根據(jù)權(quán)利要求4的細(xì)胞,其中所述酵母細(xì)胞是物種S.cerevisiae,S.cerevisiae,S.bulderi,S.barnetti,S.exiguus,S.uvarum,S.diastaticus,K.lactis,K.marxianus或K.fragilis的細(xì)胞。

6.根據(jù)權(quán)利要求1或2的細(xì)胞,其為絲狀真菌細(xì)胞。

7.根據(jù)權(quán)利要求6的細(xì)胞,其中所述絲狀真菌細(xì)胞是Aspergillus,Penicillium,Rhizopus,Trichoderma,Humicola,Acremonium或Fusarium屬的細(xì)胞。

8.根據(jù)權(quán)利要求7的細(xì)胞,其中所述絲狀真菌細(xì)胞是物種Aspergillusniger,Aspergillus?oryzae,Penicillium?chrysogenum或Rhizopus?oryzae的細(xì)胞。

9.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的細(xì)胞,其中所述細(xì)胞包含一種或多種遺傳修飾,所述遺傳修飾導(dǎo)致:

a.所述細(xì)胞中木糖轉(zhuǎn)運(yùn)提高;

b.木酮糖激酶活性提高;

c.通過(guò)戊糖磷酸途徑的通量提高;

d.醛糖還原酶活性降低;

e.對(duì)分解代謝物阻遏的敏感性降低;

f.對(duì)乙醇、滲量或有機(jī)分子的耐性提高;或

g.副產(chǎn)物的生產(chǎn)減少。

10.根據(jù)權(quán)利要求9的細(xì)胞,其中所述一種或多種遺傳修飾導(dǎo)致至少一種下述基因的過(guò)表達(dá),所述基因編碼戊糖磷酸通路的非氧化部分的一種酶。

11.根據(jù)權(quán)利要求10的細(xì)胞,其中所述基因是編碼5-磷酸核酮糖異構(gòu)酶、5-磷酸核酮糖差向異構(gòu)酶、轉(zhuǎn)酮酶或轉(zhuǎn)醛酶的基因。

12.根據(jù)權(quán)利要求10或11的細(xì)胞,其中所述一種或多種遺傳修飾導(dǎo)致至少編碼轉(zhuǎn)酮酶和轉(zhuǎn)醛酶的基因過(guò)表達(dá)。

13.根據(jù)權(quán)利要求9到12中任一項(xiàng)的細(xì)胞,其中所述一種或多種遺傳修飾導(dǎo)致編碼木酮糖激酶的基因過(guò)表達(dá)。

14.根據(jù)權(quán)利要求8到13中任一項(xiàng)的細(xì)胞,其中被過(guò)表達(dá)的所述基因是對(duì)所述細(xì)胞來(lái)說(shuō)內(nèi)源的基因。

15.根據(jù)權(quán)利要求9到14中任一項(xiàng)的細(xì)胞,其中所述一種或多種遺傳修飾導(dǎo)致所述細(xì)胞中非特異性醛糖還原酶活性的降低。

16.根據(jù)權(quán)利要求15的細(xì)胞,其中所述一種或多種遺傳修飾降低編碼非特異性醛糖還原酶的內(nèi)源基因的表達(dá),或降低所述非特異性醛糖還原酶的活性。

17.根據(jù)權(quán)利要求16的細(xì)胞,其中通過(guò)缺失所述基因的至少部分或通過(guò)破壞所述基因使所述基因失活。

18.根據(jù)權(quán)利要求16或17的細(xì)胞,其中所述細(xì)胞中編碼非特異性醛糖還原酶的每種基因的表達(dá)被降低。

19.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的細(xì)胞,所述細(xì)胞具有使用L-阿拉伯糖的能力。

20.根據(jù)權(quán)利要求9到19中任一項(xiàng)的細(xì)胞,其中基因TAL1、TKL1、RPE1和RKI1被過(guò)表達(dá)。

21.根據(jù)權(quán)利要求9到20中任一項(xiàng)的細(xì)胞,其中GRE3-基因的編碼區(qū)通過(guò)用包含基因TAL1、TKL1、RPE1和RKI1的核苷酸序列來(lái)代替所述編碼區(qū)而被失活。

22.根據(jù)權(quán)利要求9到21中任一項(xiàng)的細(xì)胞,其中表達(dá)來(lái)自Lactobacillus?plantarum的基因araA、araB和araD。

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