[發(fā)明專(zhuān)利]高純度膠原蛋白的制備

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200980101280.2
• 申請(qǐng)日: 2009-07-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102131403A
• 公開(kāi)（公告）日: 2011-07-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃玲惠
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 成功大學(xué);惠合再生醫(yī)學(xué)生技股份有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): A23L1/0562
• 分類(lèi)號(hào): A23L1/0562;A23L1/015
• 代理公司: 北京中原華和知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11019
• 代理人: 壽寧

1.一種膠原蛋白制備方法，其特征在于其包含：

提供一結(jié)締組織，其表面積為20平方毫米至2平方公尺；

以一第一酸液使該結(jié)締組織的體積至少膨脹百分之五十而形成一膨脹結(jié)締組織，其中該酸液實(shí)質(zhì)上不包含鹽類(lèi)且該酸液的酸堿值為1至6；

清洗該膨脹結(jié)締組織以除去非膠原蛋白物質(zhì)，藉此形成一膠原蛋白基質(zhì)；以及

利用一萃取液從該膠原蛋白基質(zhì)萃取出膠原蛋白，藉此制造一含有膠原蛋白的溶液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠原蛋白制備方法，其特征在于其中該萃取步驟包含研磨該膠原蛋白基質(zhì)而制得膠原蛋白粉末，以及將該膠原蛋白粉末與該萃取液混合而制得該含有膠原蛋白的溶液。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的膠原蛋白制備方法，其特征在于其中該研磨步驟以及該混合步驟同時(shí)進(jìn)行。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠原蛋白制備方法，其特征在于其另包含，在該萃取步驟之后，將膠原蛋白由該含有膠原蛋白的溶液中沉淀，以及干燥該膠原蛋白或?qū)⒃撃z原蛋白分散于一第二酸液中。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的膠原蛋白制備方法，其特征在于其中其中在該沉淀步驟中，該膠原蛋白藉由透析法沉淀。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的膠原蛋白制備方法，其特征在于其中該沉淀步驟包含將該含有膠原蛋白的溶液與一鹽類(lèi)以1.0M至4.0M的濃度混合，藉此將該膠原蛋白沉淀，并且該方法另包含，在該沉淀步驟之后，將該膠原蛋白脫鹽。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的膠原蛋白制備方法，其特征在于其中該沉淀步驟包含將該含有膠原蛋白的溶液的pH值調(diào)整至4.5至8，藉此將該膠原蛋白沉淀。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠原蛋白制備方法，其特征在于其另包含，在該萃取步驟之后，將該含有膠原蛋白的溶液與一含有蛋白水解酶的溶液混合以制造無(wú)端肽膠原蛋白(atelopeptide?collagen)。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的膠原蛋白制備方法，其特征在于其中該蛋白水解酶選自胃蛋白酶(pepsin)、鳳梨蛋白酶(bromelain)、木瓜凝乳蛋白酶(chymopapain)、胰凝乳蛋白酶(chymotrypsin)、膠原蛋白酶(collagenase)、無(wú)花果蛋白酶(ficin)、木瓜蛋白酶(papain)、勝肽酶(peptidase)、蛋白酶A(proteinase?A)、蛋白酶K(proteinase?K)、胰蛋白酶(trypsin)、微生物蛋白酶(microbial?proteases)及其混合物所組成的群組。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠原蛋白制備方法，其特征在于其中該萃取液包含由甲酸、草酸、醋酸、檸檬酸、乳酸、蘋(píng)果酸、硼酸、磷酸及其混合物所組成的群組中選擇的一種酸。

11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠原蛋白制備方法，其特征在于其中該萃取液包含一鹽類(lèi)。

12.根據(jù)權(quán)利要求4所述的膠原蛋白制備方法，其特征在于其中該第二酸液包含由甲酸、草酸、醋酸、檸檬酸、乳酸、蘋(píng)果酸、硼酸、磷酸及其混合物所組成的群組中選擇的一種酸。

13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠原蛋白制備方法，其特征在于膨脹步驟包含將該結(jié)締組織浸泡于該第一酸液且同時(shí)以一液體噴射該結(jié)締組織。

14.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠原蛋白制備方法，其特征在于其中該清洗步驟包含將該膨脹結(jié)締組織浸泡于一清洗液且同時(shí)以一液體噴射該結(jié)締組織。

15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠原蛋白制備方法，其特征在于其中該膨脹步驟包含將該結(jié)締組織浸泡于該第一酸液中，且同時(shí)以超音波處理該結(jié)締組織。

16.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠原蛋白制備方法，其特征在于其中該清洗步驟包含將該膨脹結(jié)締組織浸泡于該清洗液中，且同時(shí)以超音波處理該膨脹結(jié)締組織。

17.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠原蛋白制備方法，其特征在于其中該結(jié)締組織源自于真皮組織或筋腱。

18.根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠原蛋白制備方法，其特征在于其中該結(jié)締組織的尺寸為25平方毫米至900平方公分。