[發(fā)明專利]一種高純度光甘草定的分離純化方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910311302.X
• 申請日: 2009-12-13
• 公開（公告）號: CN101830906A
• 公開（公告）日: 2010-09-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 董維珍;郭建華;文煥松;劉丁;夏柯
• 申請（專利權(quán)）人: 成都普思生物科技有限公司
• 主分類號: C07D493/04
• 分類號: C07D493/04
• 代理公司: 成都九鼎天元知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 51214
• 代理人: 劉雪蓮;劉明芳

1.一種高純度光甘草定的分離純化方法，包括以下步驟：

(1)、有效部位的提取：取光甘草藥材，用體積百分比濃度為20％～95％的乙醇提取3次，提取溫度為30℃～60℃，提取時間分別為3、2、1h，合并提取液，在40℃～50℃的溫度下減壓濃縮，得提取物浸膏；

(2)、有效部位的富集及除雜：提取物浸膏用水懸浮后加入等體積乙酸乙酯、二氯甲烷或三氯甲烷萃取3次或3次以上，在40℃～50℃的溫度下濃縮回收乙酸乙酯、二氯甲烷或三氯甲烷至干，得光甘草定粗品；

光甘草定粗品用水分散后過聚酰胺柱層析或大孔樹脂D101柱層析分離除雜，得光甘草定樣品：光甘草定粗品分散液吸附于聚酰胺柱后依次用水、20％甲醇、50％甲醇、95％甲醇洗脫，收集80％甲醇洗脫液，濃縮至干；光甘草定粗品分散液吸附于大孔樹脂D101柱后依次用水、10％乙醇、30％乙醇、50％乙醇洗脫，收集50％洗脫液，濃縮至干；

(3)、光甘草定單體的高效液相色譜分離：將步驟(2)所得光甘草定產(chǎn)品用80％-95％甲醇溶解，利用制備型高效液相色譜柱，對光甘草定甲醇溶液進(jìn)行高效分離，以乙腈水溶液及甲醇水溶液作為流動相，流速為100～300mL/min，將步驟(2)所得光甘草定樣品甲醇水溶液進(jìn)行高效分離，HPLC在線檢測，收集產(chǎn)品純度98％以上的段落，于40℃～50℃溫度下減壓回收濃縮至干，得淡黃粉末狀的光甘草定單體；

(4)、制備所得單體溶液的處理及產(chǎn)品干燥：將步驟(3)所得光甘草定單體干品分別用20倍量(g/mL)正己烷、石油醚或甲苯在50℃下溶解為飽和溶液，4℃冰箱靜置析晶，得光甘草定單體。