[發明專利]安全、高效食用菌主培養基料的制作方法

無效

• 申請號: 200910307863.2
• 申請日: 2009-09-28
• 公開（公告）號: CN101665373A
• 公開（公告）日: 2010-03-10
• 發明（設計）人: 王光文
• 申請（專利權）人: 王光文
• 主分類號: C05F11/00
• 分類號: C05F11/00;C12N9/42;C12N9/26;C12N9/24;C12N1/20;C12R1/645;C12R1/38
• 代理公司: 岳陽市科明專利事務所
• 代理人: 彭乃恩;陳慶元

1.一種安全、高效食用菌主培養基料的制作方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)選備料

選取潔凈、干燥的原料，將原料粉碎處理完后裝入發酵裝置，然后加入原料重量40-60％的自來水，攪拌均勻；

(2)生物酶解高分子物質

將制備好的復合粗酶液，按上述原料重量10％的用量加入裝有原料的發酵裝置中，并攪拌均勻，45℃保溫酶解8-12hrs，經檢測其粗纖維、木質素含量在15-20％即可；

(3)生物降解農藥殘留

經第(2)步驟生物酶解完畢后，向發酵裝置中充入蒸汽，當料溫升至100℃時，保溫45-60mins，后冷凝至35℃，再按原料重量10％加入已制備好的降解農藥殘留復合菌種，在30-35℃保溫發酵36-48hrs，期間間歇補入無菌氧，使DO≥4.5，并不斷攪拌，其轉速為：120-160轉/min；

(4)干燥得成品

將經過第(3)步驟發酵好的料液取出，置于干燥設施中于80℃溫度下，通風干燥至含水量低于13％，經檢測合格后即得成品。

2.根據權利要求1所述的安全、高效食用菌主培養基料的制作方法，其特征在于所述的復合粗酶液的制備包括以下步驟：

(1)菌種

制備復合粗酶液選用的菌種為：黃孢原毛平革菌和褐色絲膜菌、糙皮側耳，其比例為1∶1∶1；

(2)制種用培養基：PDB液體培養基，即PDA培養基去掉瓊脂粉成份；

(3)發酵用固體培養基

a、培養基組成

30％棉子殼、30％棉桿、6％谷殼、15％稻草、18.8％麩皮、0.1％酵母膏和0.1％的硫酸銨

b、培養基配置

將棉桿、稻草粉碎至2cm左右，再按比例稱取除酵母膏和硫酸銨以外的各成份混合均勻后膨化處理，將膨化后的原料加入其重量50％的自來水，其中醇母膏和硫酸銨成份溶解在水中，攪勻，蒸煮60分鐘；

(4)發酵用菌種制作

a、一級搖瓶種子培養

取各菌種的試管斜面種，按比例挑取1-2環，接入500ml三角瓶中，其中三角瓶中裝滅菌PDB液100ml，35℃，搖床培養5-7天；

b、二級搖瓶種子培養

5L三角瓶裝1L培養液，滅菌冷卻后按10％種量接入一級搖瓶種子35℃搖床培養3天；

c、種子罐種子培養

50升種子罐，裝35升PDB培養液，滅菌冷卻后按10％種量接入二級搖瓶種子35℃下，通氣、攪拌，其中通氣量為1∶0.3，攪拌轉速為160-180轉/分，培養48小時。

d、發酵培養

500L發酵裝置裝PDB培養液350L，滅菌冷卻后，按10％種量接入種子罐種子。35℃下通氣、攪拌培養48小時即得固體發酵用菌種，其中通氣量為1∶0.3，攪拌轉速為160-180轉/分；

(5)固體發酵制備復合酶

按(3)配好的固體培養基冷卻至35℃后，按10％種量接入已制備的發酵用菌種，35℃下培養8-12hrs，期間攪拌，轉速120-160轉/分，后升溫至38-40℃下，靜置培養120-140hrs。

(6)復合粗酶液提取

發酵完成后，向發酵裝置中注入無菌去離子水，其量與發酵料比為1.5∶1，攪拌提取2-3hrs，靜置，取清液即得復合粗酶液；其中復合粗酶液中經測定其成分及其組成為：木質素酶≥50％、纖維素酶≥25％、半纖維素酶≥20％，果膠酶≥3％；其中木質素酶酶活力單位≥1500u/L。