[發(fā)明專利]雞眼睛藥材中鞣花酸類成分的含量測定方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910307842.0
• 申請日: 2009-09-28
• 公開（公告）號: CN101788537A
• 公開（公告）日: 2010-07-28
• 發(fā)明（設計）人: 王愛民;張秋生;高翔;劉智;蘭燕宇;李勇軍
• 申請（專利權）人: 貴州益康制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/36;A61K36/185
• 代理公司: 貴陽中新專利商標事務所 52100
• 代理人: 程新敏;劉楠

技術領域：

本發(fā)明涉及一種雞眼睛藥材中鞣花酸類成分的含量測定方法，屬于對中藥材 進行定量檢測的技術領域。

背景技術：

雞眼睛為省沽油科植物野鴉椿Euscaphis?japonica(Thunb.)Dippel帶花 或果的枝葉，其原植物分布江南各省和云南東北部，收載于《貴州省中藥材、民族藥材質量 標準》(2003年版)，《四川中藥志》用其果實或種子。雞眼睛為貴州少數(shù)民族用藥，性辛 、甘、平，具理氣止痛，消腫散結，祛風止癢的功效，現(xiàn)為國家食品藥品監(jiān)督管理局藥品標 準WS-10108(ZD-0108)-2002(試行)血脈通膠囊中的主要藥材之一。

血脈通膠囊(WS-10108(ZD-0108)-2002)具有活血化瘀，通經(jīng)活絡功能，臨床用于冠 心病、心絞痛，心血瘀阻證，已獲得國家發(fā)明專利一項(ZL02133416.1)。但是文獻調研發(fā) 現(xiàn)關于雞眼睛藥材的研究較少，基礎研究薄弱，缺乏可靠的定性定量方法和可供使用的對照 品，《貴州省中藥材、民族藥材質量標準》(2003年版)中僅對其進行了簡單的薄層鑒別。 因此以雞眼睛為主藥開發(fā)的制劑血脈通膠囊，其質量控制標準較為簡單，特別是未對處方 主藥雞眼睛進行含量測定等項目的檢測，因而不能很好地確保其臨床用藥的有效性及安全性 ，需要進一步研究，提高其質量控制標準。

發(fā)明內容：

本發(fā)明的目的在于：提供一種雞眼睛藥材中鞣花酸類成分的含量測定方法。本發(fā)明在同 一色譜條件下對雞眼睛藥材中的多種成分同時進行含量測定，使得雞眼睛藥材中鞣花酸類成 分的含量測定方法更具整體性、特征性和穩(wěn)定性，為有效控制雞眼睛藥材的質量以及雞眼睛 藥材的再開發(fā)應用奠定了基礎。

本發(fā)明所述雞眼睛為省沽油科植物野鴉椿Euscaphis?japonica(Thunb.)Dippel帶花 或果的枝葉。

本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的：雞眼睛藥材中鞣花酸類成分的含量測定方法為：采用高效液相色 譜法或超高效液相色譜法，在同一色譜條件下對雞眼睛藥材中所含的鞣花酸、3，3′-二甲氧 基鞣花酸、3，3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-β-D-木糖苷、3，3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-β -D-葡萄糖苷、3，3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-α-D-阿拉伯糖苷五個成分中的至少兩個成分 同時進行含量測定。

所述含量測定方法是以鞣花酸、3，3′-二甲氧基鞣花酸、3，3′-二甲氧基鞣花酸-4′ -O-β-D-木糖苷、3，3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-β-D-葡萄糖苷、3，3′-二甲氧基鞣花酸 -4′-O-α-D-阿拉伯糖苷五種對照品中的至少兩種為對照，以乙腈∶H₃PO₄水溶液＝6～100∶ 94～0為流動相梯度洗脫的高效液相色譜法或超高效液相色譜法。

具體的含量測定方法包括以下步驟：

(1)色譜條件：色譜柱為BEH?C18柱；乙腈-H₃PO₄水溶液梯度洗脫；柱溫為20℃～50℃ ；檢測波長為220～480nm；

(2)對照品溶液的制備：分別稱取鞣花酸、3，3′-二甲氧基鞣花酸、3，3′-二甲氧基 鞣花酸-4′-O-β-D-木糖苷、3，3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-β-D-葡萄糖苷、3，3′-二甲氧 基鞣花酸-4′-O-α-D-阿拉伯糖苷對照品中的至少兩種，加甲醇溶解后置同一容量瓶中，加 甲醇稀釋至刻度，得對照品溶液；

(3)供試品溶液的制備：取雞眼睛藥材粉末適量，精密稱定，加甲醇適量，提取2～8h ，濃縮后用甲醇稀釋，得供試品溶液；

(4)測定方法：按照步驟(1)所述色譜條件測定，即得。

前述步驟(1)的色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗為：

儀器：Waters?ACQUITY?UPLC色譜儀；

色譜柱：ACQUITY?UPLC?BEH?C18柱；

流動相：A為乙腈，B為0.1％～1％H₃PO₄水溶液，按A∶B＝6～100∶94～0進行梯度洗脫；

流速：0.2mL/min；

柱溫：40℃；

檢測波長：235～260nm；

進樣量：1μL；

理論塔板數(shù)計算均在160000以上。