[發(fā)明專利]雞眼睛藥材中鞣花酸類成分的含量測(cè)定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200910307842.0
• 申請(qǐng)日: 2009-09-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101788537A
• 公開(kāi)（公告）日: 2010-07-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王愛(ài)民;張秋生;高翔;劉智;蘭燕宇;李勇軍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 貴州益康制藥有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/36;A61K36/185
• 代理公司: 貴陽(yáng)中新專利商標(biāo)事務(wù)所 52100
• 代理人: 程新敏;劉楠

1.雞眼睛藥材中鞣花酸類成分的含量測(cè)定方法，其特征在于：采用高效液相色譜法或超高效液相色譜法，在同一色譜條件下對(duì)雞眼睛藥材中所含的鞣花酸、3,3′-二甲氧基鞣花酸、3,3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-β-D-木糖苷、3,3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-β-D-葡萄糖苷、3,3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-α-D-阿拉伯糖苷五個(gè)成分中的至少兩個(gè)成分同時(shí)進(jìn)行含量測(cè)定；測(cè)定方法是以鞣花酸、3,3′-二甲氧基鞣花酸、3,3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-β-D-木糖苷、3,3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-β-D-葡萄糖苷、3,3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-α-D-阿拉伯糖苷五種對(duì)照品中的至少兩種為對(duì)照，以乙腈∶H₃PO₄水溶液=6～100∶94～0為流動(dòng)相梯度洗脫的高效液相色譜法或超高效液相色譜法；該方法包括以下步驟：

（1）色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：

儀器：Waters?ACQUITY?UPLC色譜儀；

色譜柱：ACQUITY?UPLC?BEH?C18柱；

流動(dòng)相：A為乙腈，B為0.1%～1%H₃PO₄水溶液，按A∶B=6～100∶94～0進(jìn)行梯度洗脫；

流速：0.2mL/min；

柱溫：20℃～50℃；

檢測(cè)波長(zhǎng)：235～260nm；

進(jìn)樣量：1μL；

理論塔板數(shù)計(jì)算均在160000以上；

（2）對(duì)照品溶液的制備：分別稱取鞣花酸、3,3′-二甲氧基鞣花酸、3,3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-β-D-木糖苷、3,3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-β-D-葡萄糖苷、3,3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-α-D-阿拉伯糖苷對(duì)照品中的至少兩種，加甲醇溶解后置同一容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，得對(duì)照品溶液；

（3）供試品溶液的制備：取雞眼睛藥材粉末適量，精密稱定，加甲醇適量，提取2～8h，濃縮后用甲醇稀釋，得供試品溶液；?

（4）測(cè)定方法：按照步驟（1）所述色譜條件測(cè)定，即得。

2.按照權(quán)利要求1所述雞眼睛藥材中鞣花酸類成分的含量測(cè)定方法，其特征在于：流動(dòng)相梯度洗脫過(guò)程中，洗脫液的A、B相變化為：開(kāi)始時(shí)，A相6%，B相94%，穩(wěn)定1min；第19min時(shí)，A相35%，B相65%；第22min時(shí)，A相100%，B相為0。

3.按照權(quán)利要求1所述雞眼睛藥材中鞣花酸類成分的含量測(cè)定方法，其特征在于：步驟（2）對(duì)照品溶液的制備為：分別稱取鞣花酸、3,3′-二甲氧基鞣花酸、3,3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-β-D-木糖苷、3,3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-β-D-葡萄糖苷、3,3′-二甲氧基鞣花酸-4′-O-α-D?-阿拉伯糖苷對(duì)照品中的至少兩種，加甲醇溶解，得對(duì)照品儲(chǔ)備液；分別精密量取上述對(duì)照品儲(chǔ)備液，置同一容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，制得濃度≤0.1mg/ml的溶液，即得對(duì)照品溶液。

4.按照權(quán)利要求1所述雞眼睛藥材中鞣花酸類成分的含量測(cè)定方法，其特征在于：步驟（3）供試品溶液的制備為：精密稱定雞眼睛藥材粉末約1g，置于索氏提取器中，加甲醇提取2～8h，用少量甲醇洗滌提取器，洗液與提取液合并、濃縮并轉(zhuǎn)移至量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。