[發明專利]用殼聚糖去除乳清濃縮蛋白中β-乳球蛋白及回收β-乳球蛋白的方法

無效

• 申請號: 200910305852.0
• 申請日: 2009-08-20
• 公開（公告）號: CN101637217A
• 公開（公告）日: 2010-02-03
• 發明（設計）人: 劉寧;李丹丹;張微;劉鵬
• 申請（專利權）人: 黑龍江省乳品工業技術開發中心
• 主分類號: A23J3/08
• 分類號: A23J3/08
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所
• 代理人: 韓末洙

技術領域

本發明涉及乳品加工領域，特別涉及對牛乳中主要過敏原β-乳球蛋白的去除及回收的方法。

背景技術

β-乳球蛋白(β-Lg)為牛乳中的主要過敏原，能引發嬰兒的過敏反應。目前應用鹽析、選擇性沉淀、色譜技術和膜技術對β-Lg進行提取、純化以及去除。但是制備色譜柱價格昂貴，一般為10000元～50000元，而且這些方法選擇性差，在去除β-Lg的同時也去除了大部分的其他蛋白，采用純化的方法所得乳清濃縮蛋白中β-Lg含量為純化前的15％～46.7％，α-乳球蛋白(α-Lg)含量為純化前的20％～40％，純化法對β-Lg的去除率低。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是為了解決現有方法成本較高、選擇性差、對β-Lg的去除率低的問題，提供了一種用殼聚糖去除、回收乳清濃縮蛋白中β-乳球蛋白的方法。

本發明用殼聚糖去除乳清濃縮蛋白中β-乳球蛋白的方法如下：一、將WPC?80溶于超純水中，得到濃度為0.01g/mL的WPC?80超純水溶液，然后將濃度為10.0mg·mL^-1的殼聚糖溶液與WPC?80超純水溶液混合，得到殼聚糖濃度為2.0mg·mL^-1的混合溶液；二、用濃度為1mol·L^-1的NaOH溶液調節混合溶液的pH值為6.7，然后靜置10min，再以5000轉/分鐘的轉速離心15min，得到復合沉淀和上清液；三、將上清液用截留分子量為8kDa～10kDa的透析袋透析過夜，然后在真空度為0.05Pa的條件下凍干12h，得到低含量β-乳球蛋白的乳清粉，即完成用殼聚糖去除乳清濃縮蛋白中的β-乳球蛋白。

本發明回收β-乳球蛋白的方法如下：一、將濃縮型乳清蛋白WPC?80溶于超純水中，得到濃度為0.01g/mL的WPC?80超純水溶液，然后將濃度為10.0mg·mL^-1的殼聚糖溶液與WPC80超純水溶液混合，得到殼聚糖濃度為2.0mg·mL^-1的混合溶液；二、用濃度為1mol·L^-1的NaOH溶液調節混合溶液的pH值為6.7，然后靜置10min，再以5000轉/分鐘的轉速離心15min，得到復合沉淀和上清液；三、將步驟二所得復合沉淀與濃度為0.1mol·L^-1的乙酸溶液按照1∶15的體積比混合，然后用濃度為1mol·L^-1的NaOH溶液調節pH值為9.0，再磁力攪拌1分鐘，得到混合液；四、在20℃的條件下以10000轉/分鐘的轉速離心混合液20min，然后將離心后的上清液用截留分子量為8kDa～10kDa的透析袋透析過夜，再在真空度為0.05Pa的條件下凍干12h，即得含有β-乳球蛋白的乳清粉。

本發明方法對β-乳球蛋白的去除率為94.23％，同時α-La的保留率為78.68％，牛血清白蛋白(BSA)的保留率為35.41％，本發明方法操作簡單，所用殼聚糖價格為8元/g，成本較低，適合大規模生產；采用本發明方法對β-Lg的回收率為87.23％，殼聚糖的回收率可96.50％。

具體實施方式

本發明技術方案不局限于以下所列舉具體實施方式，還包括各具體實施方式間的任意組合。

具體實施方式一：本實施方式中用殼聚糖去除乳清濃縮蛋白中β-乳球蛋白的方法如下：一、將WPC?80溶于超純水中，得到濃度為0.01g/mL的WPC?80超純水溶液，然后將濃度為10.0mg·mL^-1的殼聚糖溶液與WPC?80超純水溶液混合，得到殼聚糖濃度為2.0mg·mL^-1的混合溶液；二、用濃度為1mol·L^-1的NaOH溶液調節混合溶液的pH值為6.7，然后靜置10min，再以5000轉/分鐘的轉速離心15min，得到復合沉淀和上清液；三、將上清液用截留分子量為8kDa～10kDa的透析袋透析過夜，然后在真空度為0.05Pa的條件下凍干12h，得到低含量β-乳球蛋白的乳清粉，即完成用殼聚糖去除乳清濃縮蛋白中的β-乳球蛋白。

本實施方式中對β-乳球蛋白的去除率為94.23％，同時α-La的保留率為78.68％，牛血清白蛋白(BSA)的保留率為35.41％。

具體實施方式二：本實施方式與具體實施方式一不同的是步驟三中所述透析袋的截留分子量為8.5kDa～9.5kDa。其它與具體實施方式一相同。

具體實施方式三：本實施方式與具體實施方式一不同的是步驟三中所述透析袋的截留分子量為9kDa。其它與具體實施方式一相同。