[發明專利]一種類肝素多糖的制備方法

有效

• 申請號: 200910273257.3
• 申請日: 2009-12-15
• 公開（公告）號: CN101717455A
• 公開（公告）日: 2010-06-02
• 發明（設計）人: 楊建紅;伍康;張秋花;杜予民
• 申請（專利權）人: 武漢大學
• 主分類號: C08B37/10
• 分類號: C08B37/10
• 代理公司: 武漢華旭知識產權事務所 42214
• 代理人: 劉榮;周宗貴

1.一種類肝素多糖的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)磷酸處理：將甲殼素與60wt％～90wt％的磷酸按質量比為1∶10～30的比例混合，室溫下攪拌至甲殼素完全溶解，接著在攪拌條件下將該溶液加入到水中，水的質量為甲殼素質量的30～200倍，沉淀后離心分離，再用水洗滌沉淀至中性得到酸處理產物；

(2)6位選擇性氧化反應：將酸處理產物分散于水中，水的質量為甲殼素質量的20～50倍，冰浴條件下加入2，2，6，6-四甲基哌啶-1-氧自由基和NaBr固體，2，2，6，6-四甲基哌啶-1-氧自由基和NaBr固體的質量分別為甲殼素質量的0.5％～2％和10％～45％，攪拌至完全溶解后加入3wt％～10wt％的NaClO溶液，NaClO溶液的質量為甲殼素質量的8～30倍，反應過程中使溶液的pH值穩定在9.5～10.8，反應0.5～1小時，然后加入甲醇、乙醇、正丙醇或異丙醇，甲醇、乙醇、正丙醇或異丙醇的質量為NaClO溶液質量的0.05～0.3倍，調節體系pH值至中性，然后將溶液透析或超濾凈化，再減壓蒸餾濃縮，用甲醇、乙醇、丙酮或乙醚沉淀，將沉淀物真空干燥得到6位選擇性氧化反應產物；

(3)脫乙酰反應：將6位選擇性氧化反應產物分散在NaOH的乙醇-水溶液中，該NaOH的乙醇-水溶液中NaOH的濃度為10wt％～35wt％，乙醇與水的體積比為4～8∶1，該NaOH的乙醇-水溶液的質量為甲殼素質量的10～30倍，然后在50～70℃攪拌反應0.5～2小時，反應結束后過濾，將產物用水溶解后再調節體系pH值至中性，透析或超濾凈化，減壓蒸餾濃縮，用甲醇、乙醇、丙酮或乙醚沉淀，真空干燥得到脫乙酰反應產物；

(4)將脫乙酰反應產物經磺化反應或硫酸酯化反應得到類肝素多糖，所述磺化反應的具體方法為：將脫乙酰反應產物溶解于水中，水的質量為甲殼素質量的10～100倍，接著加入三甲胺-三氧化硫復合物和Na₂CO₃，三甲胺-三氧化硫復合物和Na₂CO₃的加入量分別為甲殼素糖殘基物質的量的3～10倍和2.5～5.0倍，于40～65℃恒溫攪拌反應8～16小時，然后將反應液經透析或超濾凈化，減壓蒸餾濃縮，用甲醇、乙醇、丙酮或乙醚沉淀，真空干燥得到類肝素多糖；所述硫酸酯化反應的方法為：將脫乙酰反應產物分散于DMF、DMSO或甲酰胺中，DMF、DMSO或甲酰胺的質量為甲殼素質量的10～50倍，在40～60℃攪拌0.5～2小時，然后加入三氧化硫吡啶復合物，三氧化硫吡啶復合物與脫乙酰反應產物糖殘基的物質的量之比為1～4∶1，攪拌反應3～6小時，將反應液經冰水冷卻，再用1wt％～10wt％的堿溶液中和，然后將反應液透析或超濾凈化，減壓蒸餾濃縮，用甲醇、乙醇、丙酮或乙醚沉淀，真空干燥得到類肝素多糖。

2.根據權利要求1所述的類肝素多糖的制備方法，其特征在于：將步驟(4)中磺化反應的最終產物分散于DMF、DMSO或甲酰胺中，DMF、DMSO或甲酰胺的質量為甲殼素質量的10～50倍，在40～60℃攪拌0.5～2小時，然后加入三氧化硫吡啶復合物，三氧化硫吡啶復合物與磺化反應產物糖殘基的物質的量之比為1～4∶1，攪拌反應3～6小時，將反應液經冰水冷卻，再用1wt％～10wt％的堿溶液中和，然后將反應液透析或超濾凈化，減壓蒸餾濃縮，用甲醇、乙醇、丙酮或乙醚沉淀，真空干燥得到類肝素多糖。

3.根據權利要求1所述的類肝素多糖的制備方法，其特征在于：步驟(2)反應過程中是用NaOH、KOH、Na₂CO₃或K₂CO₃調節溶液的pH值使其穩定在9.5～10.8。

4.根據權利要求1所述的類肝素多糖的制備方法，其特征在于：步驟(2)和(3)中是用鹽酸、磷酸、乙酸、丙酸、或0.5wt％～20wt％稀硫酸調節體系pH值至中性。

5.根據權利要求1或2所述的類肝素多糖的制備方法，其特征在于：所述1wt％～10wt％堿溶液中的堿為KOH、NaOH、Na₂CO₃、K₂CO₃或氨水。