[發明專利]微生物同步發酵正十一烷生產十一碳二羧酸方法

在審

• 申請號: 200910256588.6
• 申請日: 2009-12-30
• 公開（公告）號: CN102115767A
• 公開（公告）日: 2011-07-06
• 發明（設計）人: 曹務波;陳遠童;曹荀梅子
• 申請（專利權）人: 曹務波
• 主分類號: C12P7/44
• 分類號: C12P7/44;C12R1/74
• 代理公司: 濟南舜源專利事務所有限公司 37205
• 代理人: 辛向東

1.一種微生物同步發酵正十一烷生產十一碳二羧酸方法，其特征在于所用的微生物為熱帶假絲酵母(Candida?tropicalis)ly-1，該菌種已在中國典型培養物保藏中心保藏，保藏號為：CCTCC?NO：M209223。

2.如權利要求1所述微生物同步發酵正十一烷生產十一碳二羧酸方法，其特征在于以熱帶假絲酵母(Candida?tropicalis)ly-1為發酵種子，在以正十一烷為基質的培養基中同步發酵，生產α，ω-十一碳二元酸。

3.如權利要求2所述微生物同步發酵正十一烷生產十一碳二羧酸方法，其特征在于所說的發酵種子是由熱帶假絲酵母(Candida?tropicalis)ly-1菌株經斜面培養、液體種子培養基培養，獲得一級種子罐的種子；所使用的固體斜面培養基為10個巴林糖度的麥芽汁加2％瓊脂制成；液體培養基為10個巴林的麥芽汁；混合液體種子培養基包含：KH₂PO₄6-12g/L，玉米漿3-8g/L，酵母膏3-8g/L，蔗糖13-38g/L，尿素3-6g/L，自來水配制，自然PH。

4.如權利要求2所述微生物同步發酵正十一烷生產十一碳二羧酸方法，其特征在于所說的同步發酵過程如下：

發酵培養基的主要組成為：堿金屬磷酸鹽6-14g/L、氯化鈉0.5-2.0g/L、酵母膏1-6g/L、玉米漿3-5g/L、尿素0.5-2.5g/L、硝酸鹽5-10g/L、蔗糖10-30g/L、消泡劑400-1200ppm，其中堿金屬磷酸鹽可從KH₂PO₄、NaH₂PO₄、K₂HPO₄和Na₂HPO₄中選一種，硝酸鹽可從鉀或鈉鹽中選一種；

發酵基質正十一烷烴和發酵培養基在混合發酵液中的用量比例為：10-45％(V/V)的正十一烷烴和55-90％(V/V)發酵培養基；

具體發酵操作方法為：

將發酵種子按發酵培養基量的15-25％(V/V)的用量，接入PH?5.5-9.0的含有10-45％(V/V)正十一烷烴的發酵培養基的混合液中，在PH?5.8-7.5之間，將上述混合物在25-32℃，通氣發酵48-160小時；28小時內，PH控制在6.8以下，以菌體生長為主，產酸為副，此時菌株生長光密度OD達到0.4以上，產酸達到18-25g/L，在28-60小時，PH控制在7.3以下，產酸為主，菌體生長為副，此時OD達至0.8左右，產酸達到45-65g/L，從60小時以后，每隔4-6小時用NaOH溶液調一次PH至7.5-8.0，菌體量不再增加，而產酸量繼續迅速增加，發酵完成后，將產生的二羧酸從發酵液中分離出來；在發酵過程中，補加正烷烴，使發酵液中正烷烴濃度始終≥5％(V/V)。