[發明專利]一種發酵轉化正十七烷生產十七碳二元酸的方法

有效

• 申請號: 200910256586.7
• 申請日: 2009-12-30
• 公開（公告）號: CN102115765A
• 公開（公告）日: 2011-07-06
• 發明（設計）人: 曹務波;陳遠童;曹荀梅子
• 申請（專利權）人: 曹務波
• 主分類號: C12P7/44
• 分類號: C12P7/44;C12R1/74
• 代理公司: 濟南舜源專利事務所有限公司 37205
• 代理人: 辛向東

1.一種微生物發酵轉化正十七烷生產十七碳二元酸的方法，其特征在于所用的微生物為熱帶假絲酵母(Candida?tropicalis)ly-7，該菌種已在中國典型培養物保藏中心保藏，保藏號為：CCTCC?NO：M209225。

2.如權利要求1所述微生物發酵轉化正十七烷生產十七碳二元酸的方法，其特征在于以熱帶假絲酵母(Candida?tropicalis)ly-7為發酵種子，在以正十七烷為發酵基質的培養基混合液中發酵轉化，生產α，ω-十七碳二元酸。

3.如權利要求2所述微生物發酵轉化正十七烷生產十七碳二元酸的方法，其特征在于所說的發酵種子是由熱帶假絲酵母(Candida?tropicalis)ly-7菌株經斜面培養、液體種子培養基培養，獲得一級種子罐的種子；所使用的固體斜面培養基為10個巴林糖度的麥芽汁加2％瓊脂制成；液體種子培養基，包含KH₂PO₄6-10g/l，蔗糖20-30g/l，酵母膏3-6g/l，玉米漿3-5g/l，尿素2-5g/l，自來水配置，PH5.0。

4.如權利要求2所述微生物發酵轉化正十七烷生產十七碳二元酸的方法，其特征在于所說的發酵轉化過程如下：

發酵培養基的組成為：堿金屬磷酸鹽4-12g/l，NaCl?0.5-2.0g/l，酵母膏0.8-5g/l，玉米漿0.5-3g/l，尿素0.8-2.2，蔗糖5-30g/l，NaAC?5-20g/l，丙烯酸0.2-3ml/l，維生素10-100mg/l；堿金屬磷酸鹽可以從K₂HPO₄，K₂HPO₄，NaH₂PO₄和Na₂HPO₄之中選一種，維生素可選用維生素A或B；

發酵混合液中，含有10-40％(v/v)正十七烷烴利90-60％(v/v)發酵培養基；

具體發酵過程如下：

將前述制備的發酵種子，按發酵培養基量的15-25％(V/V)的用量，接入PH?5.0-8.5，含有10-40％(v/v)正十七烷烴和90-60％(v/v)發酵培養基的混合液中，將上述混合液在24-32℃，通氣發酵48-168小時；發酵60小時以內，PH控制在7.5以下，60-120小時，PH控制在8.0以下，120-168小時，PH控制在8.5以下；發酵到60、90、120小時，分別補加nC₁₇，使發酵液中nC₁₇的濃度≥5％(v/v)。

5.如權利要求2所述微生物微生物發酵轉化正十七烷生產十七碳二元酸的方法，其特征在于所說的發酵轉化過程如下：

發酵培養基的主要組成為：堿金屬磷酸鹽7-10g/l，NaCl?0.5-2.0g/l，酵母膏2-4g/l，玉米漿0.5-3g/l，尿素1-2g/l，蔗糖15-25g/l，NaAC?10-15g/l，丙烯酸1-2ml/l，維生素30-60ml/l；堿金屬磷酸鹽可以從K₂HPO₄，K₂HPO₄，NaH₂PO₄和Na₂HPO₄之中選一種，維生素可選用維生素A或B；

發酵混合液中，含有10-20％(v/v)正十七烷烴和80-90％(v/v)發酵培養基。

具體發酵過程如下：

將前述制備的發酵種子，按發酵培養基量的15-25％(V/V)的用量，接入PH?PH6.5-8.0的含有10-20％(v/v)正十七烷烴和80-90％(v/v)發酵培養基的混合液中，將上述混合液在24-32℃，最適宜溫度為28-30℃下，通氣發酵48-168小時；發酵60小時以內，PH控制在7.5以下，60-120小時，PH控制在8.0以下，120-168小時，PH控制在8.5以下；發酵到60、90、120小時，分別補加nC₁₇，使發酵液中nC₁₇的濃度≥5％(V/V)。