[發明專利]基于雀稗固氮菌的根際促生菌肥及其制備方法

無效

• 申請號: 200910256099.0
• 申請日: 2009-12-29
• 公開（公告）號: CN102108335A
• 公開（公告）日: 2011-06-29
• 發明（設計）人: 陳宏坤;范玲超;葛雨明
• 申請（專利權）人: 山東金正大生態工程股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C05F11/08;C12R1/01
• 代理公司: 濟南金迪知識產權代理有限公司 37219
• 代理人: 許德山

技術領域

本發明屬于生物肥料領域，涉及一種菌肥，同時還涉及該菌肥的生產方法，尤其涉及一種對小麥類禾本科作物具有固氮、溶磷、促生作用的高效根際菌肥及其制備方法。

背景技術

植物根際促生菌(Plant?Growth?Promoting?Rhizobacteria，簡稱PGPR)是指自由生活在土壤或定植于植物根表、根內或莖葉的一類可促進植物生長、防治病害、增加作物產量的有益微生物。通常指具有固氮、溶磷、產生植物激素、分泌抗生素和產生促進植物生長生理活性物質等能力或至少具有其中之一能力的細菌。其可增加植物的植物量，提高植物營養品質，誘導植物系統產生抗病性等諸多功效。PGPR是80年代發展起來的一種菌肥，它應用面積較廣，主要用于禾本科、蔬菜類，它能產生生長素、抑制病原菌、固氮和分解磷化物，PGPR的作用不是單一的，接種大量優勢有益細菌于作物根際，促生作用是綜合的結果，它并不是普通微肥某一種效應而是一種綜合效應。作用機理：分泌植物促生物質，有人從能促進難溶性磷轉化的50個分離物中，發現43個產生植物生長激素，29個產生赤霉素，45個產生激動素類物質，在這些PGPR中還分泌多種維生素，細維生B1、B6、H、B12等，還有的能分泌氨基酸；促進出芽，調控土傳病害。減輕土傳病害、降低發生的次數。PGPR能產生鐵載體，它能對Fe3+具有超強絡合力，能產生大量鐵載體的根際細菌在與不能產生鐵載體或產量很小的有害微生物競爭鐵素營養時將占優勢，從而抑制有害微生物的生長繁殖，表現出生物防治作用。

目前，國內PGPR菌的研究及相關生態菌肥的生產報道不多。國外，特別是印度、巴基斯坦、巴西、美國、澳大利亞等國家做了廣泛的研究，已有自己的PGPR生態菌肥產品，同時新的研究領域和新技術不斷出現。因不同生境的植物根系、莖桿生存著特定的促生菌菌株，因此我們只能借鑒國外的成功經驗，從我國特定氣候，生境中分離出PGPR菌株，以生產出適合我國氣候、生境的生物菌肥，同時要在理論方面作更是深入的研究。目前，國內豆科植物生物肥料較多，但禾本科及其他非豆科植物生物肥料空缺。世界范圍內禾本科作物種植面積較大，具有重要的經濟價值和生態功能。它們大多數都以氮、磷為主要的營養元素。大量研究結果表明，PGPR在小麥、玉米、水稻、甘蔗等禾本科植物根際得到分離，PGPR的研究范圍和內容也在不斷擴展和深入。PGPR特別是兼具固氮、溶磷、產生植物激素、分泌抗生素于一身的菌種，是寶貴的生物資源，它們的開發利用將在生物菌肥的研制和禾本科植物的研發中起到舉足輕重的作用。故從市場需求及人們環保意識增強等方面考慮，生態菌肥的研究及其開發具有重要的現實意義和廣闊的發展前景。

發明內容

針對現有技術的不足，本發明目的是，提供一種具有固氮、溶磷、分泌促生植物激素作用的菌肥，該肥料適應性強、性能穩定，具有固氮、溶磷、促生長等多種功能。同時，本發明的目的還在于提供一種小麥禾本科作物用高效根際菌肥的制備方法。本發明通過如下技術措施實現：

菌株雀稗固氮菌的篩選：

1.土樣采集

樣品采自臨沂地區小麥根際沉積物，樣品采集后裝入滅菌的封口聚乙烯袋中，低溫保存。

2.培養基

(1)LB培養基：蛋白胨10g、酵母膏5g、NaCl?10g、Agar?20g，總體積1000ml(蒸餾水補足)，pH?7.0-7.5；

(2)NFM培養基：蘋果酸5g、K₂PHO₄?0.5g、MgSO₄·7H₂O?0.2g、CaCl₂·2H₂O?0.02g、NaCl?0.1g、NaMoO₄·2H₂O?0.002g、KOH?4.5g、Bromothymol?Blue(BTB?0.5％)5ml、Biotine10ug、Agar?2％(固體培養基)，總體積1000ml(蒸餾水補足)，PH7.0-7.5；

(3)CCM培養基：KH₂PO₄?0.2g、NaCl?0.1g、K₂HPO₄?0.8g、Na₂FeEDTA28mg、鉬酸鈉25mg、酵母浸膏100mg、甘露醇5g、蔗糖5g、乳酸鈉0.5ml、蒸餾水900ml。

3.菌株篩選方法