[發明專利]一種應用代謝組學對中成藥質量評價的方法

無效

• 申請號: 200910248534.5
• 申請日: 2009-12-18
• 公開（公告）號: CN102100706A
• 公開（公告）日: 2011-06-22
• 發明（設計）人: 許國旺;趙新峰;孔宏偉
• 申請（專利權）人: 中國科學院大連化學物理研究所
• 主分類號: A61K36/00
• 分類號: A61K36/00;A61K36/8945;G01N30/72
• 代理公司: 沈陽科苑專利商標代理有限公司 21002
• 代理人: 馬馳;周秀梅

技術領域

本發明屬中藥質量控制和評價方法，特別是采用生物指紋控制和評價中藥質量，主要采用代謝組學相關技術和策略進行研究。

背景技術

中醫藥是中華民族的瑰寶，被稱為中國古代的第五大發明。中藥以其豐富的資源、獨特的療效、毒副作用少等特點，已引起世界各國的普遍關注。當今世界，隨著“回歸自然”思潮的興起，尋找天然藥物的呼聲目漸高漲，面對醫療模式的轉變，面對傳統醫藥國際市場的競爭，面對加入WTO后知識產權的保護，中藥的發展面臨著良好的機遇和嚴峻的挑戰。中藥質量控制與保障是中藥現代化、產業化及國際化的核心問題，中藥的質量不可控、安全不可靠一直是其走向世界的“瓶頸”。與國際制藥大國水平相比，我國絕大多數中藥產品的生產工藝仍十分落后，對制藥過程參數缺乏合理控制，不同廠家的同一產品或同一廠家不同批次的產品存在較大差異，這種狀況已直接成為我國絕大部分中藥迄今未能走出國門的一個重要原因。為保證中藥產品的安全性、有效性和穩定均一性，當前急需發展先進的中藥質量分析檢測技術，完善中藥材、提取物、中成藥質量標準，建立符合中醫藥特點的現代質量控制體系，攻克中藥質量分析與評價難題。

現行中藥質量控制的基本模式是參照國外植物藥的質量控制方法，借鑒化學藥品質量控制的模式建立的，化學定性鑒別與指標成分檢測是其主要內容。對于中醫理論指導下的中藥，尤其是復方制劑，檢測任何一種活性成分均不能體現其整體療效，這是中藥與化學藥品質量標準的根本區別。目前這種質控模式既難以有效地監控中藥質量，也不能評價中藥質量，更難以反映其安全性和有效性。如冬蟲夏草測定腺苷含量、板藍根檢測精氨酸的存在，而腺苷和精氨酸既不是其主要有效成分，也不是其專屬性成分，檢測它們對其中藥質量控制幾乎沒有實際意義。即使是檢測有效成分，往往量效關系不明顯，也難以實現對其中藥質量進行有效的控制和評價。另外一個主流的質量控制方法：考慮到中藥的多成分和整體作用，應用化學指紋圖譜的方法，控制中藥直接提取物中的盡量多的成分。對于中藥而言，其療效既不是單一活性成分的作用，也不是多種成分活性的簡單相加，而是多個功能組分的整體表現，是多成分、多靶點協同作用的結果。中藥化學指紋圖譜雖然考慮了盡可能多的成分，對保證產品質量一致性和穩定性具有一定的促進作用，但同樣難以反映其安全性和有效性，成分與藥效之間的關聯性在現階段還沒有得到有效的表達。另外，中藥化學指紋圖譜只是中藥部分成分的“化學條形碼”，不能對所有成分進行全面控制，有相當一部分藥物成分難以用常規的色譜或光譜方法檢識，化學指紋圖譜的重復性、專屬性和代表性等尚需深入研究。

因此，現有的中藥質量控制模式雖然為保障中藥及其產品的有效、安全和質量的穩定可控發揮了重要的作用，但還不足以說明中藥的整體作用和作用的多成分、多靶點協同特點。有必要重新審視和明確中藥質量控制和評價的目標與策略、模式與方法，有必要建立一套既能保證“穩定可控”，又能直接關切“安全有效”的新型中藥質量控制管理方法體系。

中藥生物指紋圖譜學是從分子水平上研究中藥作用的本質特征，研究化學成分和藥理作用、藥效活性的相關性。代謝組學作為一門新發展的技術，它是通過考察生物體系受刺激或擾動后其代謝產物的變化或其隨時間的變化，來研究生物體系的一種技術。代謝組是基因-蛋白-代謝產物這樣一個生命活動鏈的終點集合體，所反應的就是疾病、中藥對生命體作用所產生效應的最終結果和表現，這與中醫中藥的哲學思想十分吻合。任何外源物質、病理生理變化或遺傳變異的作用都會反映到各種生物學途徑上，對內源代謝物質的穩態平衡產生干擾，從而使內源代謝物中的各種物質的濃度和比例發生變化。因此，應用代謝組學方法可從整體上對中藥的毒性、療效和作用機理進行評價，也可用于中藥的質量控制。

發明內容

本發明提供了一種采用代謝指紋圖譜控制和評價中成藥質量的方法，該方法主要包括以下步驟：

1)根據中藥的主要適應證，篩選建立相應的動物(細胞)模型；

2)根據中藥的傳統用藥方法制備各樣品，并采用相應的給藥途徑對動物(細胞)模型進行干預；

3)收集相應的生物樣本，獲取其代謝指紋圖譜；

4)對正常組和模型組的代謝指紋進行模式識別，獲取差異性內源代謝物(代謝標志物組)；

5)計算代謝標志物組在不同給藥組中與正常組的相似度，或對差異性內源代謝物做PLS回歸分析，考察藥物治療對內源性代謝的影響；

6)根據相似度計算結果或PLS分析結果，評價各樣品的優劣。