[發明專利]一種用高效液相色譜法測定阿達帕林中間體有關物質的方法

無效

• 申請號: 200910244382.1
• 申請日: 2009-12-30
• 公開（公告）號: CN102116764A
• 公開（公告）日: 2011-07-06
• 發明（設計）人: 張燕;康彥龍;劉秋葉
• 申請（專利權）人: 北京德眾萬全醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/50
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬涉及一種高效液相色譜分離分析方法，特別是一種用高效液相色譜法分離分析阿達帕林中間體有關物質的方法。

背景技術

阿達帕林是一種維甲酸類化合物，具有抗炎特性，是治療痤瘡的皮膚新藥。其中間體結構式：

分子式：C₂₇H₂₆O₃，分子量：398.50

該化合物的HPLC分析方法現無文獻報告，也無專利申請報告。

本法有效的對阿達帕林中間體進行純度分析，本試驗采用普通的色譜柱(C₈色譜柱)快速準確的實現了阿達帕林中間體有關物質的測定，從而實現了阿達帕林中間體雜質的控制，保證了阿達帕林中間體的質量可控，在合成和制劑過程的質量控制方面具有重要的現實意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一種分離分析阿達帕林中間體有關物質的高效液相色譜方法，從而實現對阿達帕林中間體的質量控制。

申請人發現，用辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，以緩沖鹽溶液-有機改性劑為流動相，可以實現阿達帕林中間體與其中間體的分離與分析，從而可以準確控制阿達帕林中間體及其制劑的質量。

本發明所用的高效液相色譜法分離分析阿達帕林中間體的方法，選用辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱。

本發明采用的緩沖鹽選自磷酸二氫鈉，醋酸銨，優選自醋酸銨。

本發明采用的有機改性劑選自乙腈、甲醇，最優選的有機改性劑為甲醇。

本發明采用的色譜柱為辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，型號為250mm×4.6mm，5μm。

本發明方法的流動相中，醋酸銨溶液-甲醇溶液的體積比為20∶80～10∶90，進一步為12∶88。

本發明所述的分離分析方法，可按照以下方法實現：

(1)稱取阿達帕林中間體樣品適量，先用適量的四氫呋喃溶解，再用流動相稀釋至刻度，配制成每1ml約含阿達帕林中間體0.2mg～2mg的樣品溶液。

(2)設置流動相流速為0.8～1.2ml/min，檢測波長為234nm。

(3)取步驟(1)的樣品溶液5-40μl注入液相色譜儀，完成阿達帕林中間體的分離與分析。

其中：

高效液相色譜儀：島津：LC-10ATvp，SPD-10Avp，SCL-10Avp，DGU-12A

色譜柱：辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱(250mm×4.6mm，5μm)

流動相：醋酸銨溶液-甲醇＝12∶88

流速：1.0ml/min

檢測波長：234nm

柱溫：室溫

進樣體積：10μl

本發明能夠有效測定阿達帕林中間體的有關物質，方法簡單快捷，分析靈敏度高，結果準確可靠。可用于阿達帕林中間體的質量控制，確保原料藥和制劑的質量可控。

附圖說明

圖1實施例1，醋酸銨溶液-甲醇(12∶88)阿達帕林中間體與中間體混合樣品高效液相色譜圖

圖2實施例2，醋酸銨溶液-甲醇(12∶88)阿達帕林中間體高效液相色譜圖

具體實施方式：以下實施例用于進一步理解本發明，但不限于本實施的范圍

實施例1

儀器與條件

高效液相色譜儀：日本島津：LC-10ATvp，SPD-10Avp

色譜柱：辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱(250mm×4.6mm，5μm)

流動相：醋酸銨溶液-甲醇(12∶88)

流速：1.0ml/min

檢測波長：234nm

柱溫：室溫

進樣體積：10μl

實驗步驟

稱取阿達帕林中間體10mg，中間體I，II，III各5mg，置于25ml容量瓶中，先用適量的四氫呋喃溶解，搖勻，再用流動相稀釋至刻度，作為供試品溶液。取供試品溶液，在上述色譜條件下進行高效液相色譜分析，記錄色譜圖，結果見附圖1。

圖1中保留時間為6.94分鐘的色譜峰為阿達帕林中間體的色譜峰，保留時間為3.4、12.5、20.0分鐘色譜峰為中間體I，II，III的色譜峰。色譜圖表明阿達帕林中間體與其中間體及雜質可以在同一色譜條件下達到良好的分離。

實施例2

儀器與條件

高效液相色譜儀：日本島津：LC-10TAvp，SPD-10Avp

色譜柱：辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱(250mm×4.6mm，5μm)