[發明專利]檢測待測水稻是否為科豐6號轉基因水稻的方法及其專用試劑盒有效
| 申請號: | 200910241993.0 | 申請日: | 2009-12-18 |
| 公開(公告)號: | CN101724699A | 公開(公告)日: | 2010-06-09 |
| 發明(設計)人: | 張琰;黃新;朱水芳 | 申請(專利權)人: | 中國檢驗檢疫科學研究院 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人: | 關暢;任鳳華 |
| 地址: | 100029 北京市朝陽區惠新西*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 檢測 水稻 是否 轉基因 方法 及其 專用 試劑盒 | ||
1.特異性引物對和探針在制備檢測待測水稻是否為轉基因水稻品系科豐6號的 試劑盒中的應用;所述特異性引物對為序列表的序列1所示核苷酸和序列表的序列2 所示核苷酸組成的引物對,所述探針的核苷酸序列如序列表的序列3所示。
2.如權利要求1所述的應用,其特征在于:所述特異性探針為TaqMan熒光探針, 所述特異性探針的5’端標記有FAM熒光基團,3’端標記有TAMRA淬滅基團。
3.一種檢測待測水稻是否為轉基因水稻品系科豐6號的試劑盒,它包括序列表 的序列1所示核苷酸和序列表的序列2所示核苷酸組成的特異性引物對,和核苷酸序 列如序列表的序列3所示的特異性探針。
4.如權利要求3所述的試劑盒,其特征在于:所述特異性探針為TaqMan熒光探 針,所述特異性探針的5’端標記有FAM熒光基團,3’端標記有TAMRA淬滅基團。
5.權利要求3或4所述試劑盒在檢測待測水稻是否為轉基因水稻品系科豐6號 中的應用。
6.一種檢測待測水稻是否為轉基因水稻品系科豐6號的方法,是以待測水稻的 基因組DNA為模板,用序列表的序列1所示核苷酸和序列表的序列2所示核苷酸組 成的特異性引物對,和核苷酸序列如序列表的序列3所示的特異性探針進行實時熒光 PCR檢測,確定待測水稻是否為轉基因水稻品系科豐6號;所述特異性探針為TaqMan 熒光探針,所述特異性探針的5’端標記有FAM熒光基團,3’端標記有TAMRA淬滅基 團;
所述實時熒光PCR的PCR體系中,反應起始時,所述特異性引物對中的兩條引 物的濃度均為0.2μmol/L,所述特異性探針的濃度為0.1μmol/L;所述實時熒光PCR的 參數如下:50℃、2min;95℃、10min;95℃、15s,60℃、1min,共40個循環。
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