[發明專利]一種沉香誘導劑及其制備方法

在審

• 申請號: 200910241212.8
• 申請日: 2009-12-02
• 公開（公告）號: CN101731282A
• 公開（公告）日: 2010-06-16
• 發明（設計）人: 魏建和;張爭;楊云;孟慧;高志暉;陳偉平;馮錦東;陳懷瓊
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院藥用植物研究所
• 主分類號: A01N63/04
• 分類號: A01N63/04;A01P21/00
• 代理公司: 北京捷誠信通專利事務所 11221
• 代理人: 魏殿紳

技術領域

本發明涉及生物技術領域，尤其涉及一種沉香誘導劑及其制備方法。

背景技術

白木香Aquilaria?sinensis(Lour.)Gilg，又稱土沉香，屬瑞香科沉香屬植物， 為我國特有的熱帶及亞熱帶常綠喬木，是我國生產名貴芳香類藥材沉香的唯一 植物來源，現已被列為國家二級瀕危保護植物。沉香是我國、日本、印度以及 其他東南亞國家的傳統名貴藥材和名貴的天然香料，其性辛、苦，微溫，能行 氣止痛、溫中止嘔、納氣平喘(中華人民共和國藥典委員會.中華人民共和國 藥典(一部)[S].北京：化學工業出版社，2005，128.)。在沉香中存在兩種主 要的成分倍半萜類化合物和色酮類化合物(楊峻山.沉香化學成分的研究概況 [J].天然產物研究與開發，1998，10(1)：99-103.戚樹源，林立東，胡厚才.白 木香中色酮類化合物的形成[J].中草藥，2000，31(9)：658-659.)。商業上 的巨大利潤和非法貿易正導致世界各地的沉香越來越少。2000年白木香被世界 自然保護聯盟(IUCN)列入IUCN紅色名錄。2004年白木香列入了《瀕危野生 動植物種國際貿易公約》(ITES，即華盛頓公約)附錄，同時產于東南亞等各國 生產沉香的沉香屬所有植物均列入了該公約名錄。

健康的白木香樹體不能產生沉香類物質，樹體必須受到各種傷害及真菌侵染 后才能夠產生。自上世紀30年代，國外就開展了大量接菌結香研究。從沉香屬 植物樹體的結香部位分離報道的真菌主要有色二孢菌(Diplodia?sp.)、可球二 孢菌(Botryodiplodia?theobromae)、鐮刀菌(Fusarium?sp.)、磚紅鐮孢(Fusarium laseritum)、曲霉(Aspergillus?sp.)、毛霉(Mucor?sp.)、青霉(Penicillium?sp.)、木霉 (Trichoderma?sp.)、裂褶菌(Schizophyllum?sp.)等(Bose?S?R.The?Nature?of?agar formation[J].Sci?Cult，1934，4(2)：89-91.Bose?S?R.Enzymes?ofwood-rotting fungi[J].Ergeb?Enzymforsch，1939，8：267-276.Subeham，Junya?U，Fujino?H， et?al.A?field?survey?of?agarwood?in?Indonesia[J].J?Trad?Medicines，2005，22(4)： 244-251.Gibson?IAS.The?role?of?fungi?in?the?origin?of?oleoresin?deposits(Agaru) in?the?wood?of?Aquillaria?agallocha(Roxb.)[J].Bano?Biggyn?Patrika，1977，6(1)： 16-26.Nobuchi?T，Somkid?S.Preliminary?observation?of?Aquliaria?crassna?wood associated?with?the?formation?of?aloeswood?bult[J].Kyoto?Univ?Forests，1991，63： 226-235.Ng?L?T，Chang?YS，Azizol?L?K.?Areview?on?agar(gaharu)producing Aquilaria?species[J].J?Trop?For?Products，1997，2(2)：272-285.)。研究認 為沉香的形成可能是由于樹干損傷后被上述一種或數種真菌侵入寄生，在真菌 體內酶的作用下，使木薄壁細胞貯存的淀粉發生一系列變化，形成香脂，經多 年沉積而得(Ng?L?T，Chang?Y?S，Azizol?L?K.A?review?on?agar(gaharu)producing Aquilaria?species[J].J?Trop?For?Products，1997，2(2)：272-285.Tamuli?P， Boruah?P，Samanta?R.Biochemical?changes?in?agarwood?tree?(Aquilaria malaccensis?Lamk.)during?pathogenesis[J].J?Spices?and?Aromat?Crops，2004， 13：87-91.)。國內的真菌侵染研究主要集中在黃綠墨耳菌(Menanotus?flavolives) 對白木香的侵染。1976年廣東植物研究所對鑿洞后1、6、12、18、24個月的五 批白木香樣品進行了組織化學和解剖學研究。組織化學研究結果顯示，木材薄 壁細胞內的淀粉依次經過中間產物非淀粉的多糖、醛類或酮類及酚類化合物轉 化成了沉香。解剖學研究結果顯示在白木香成香過程中伴隨著真菌的生長，推 斷在沒有菌絲存在的情況下不能結香，但是令人疑惑的是在菌絲分布最密集的 區域-砍傷面下幾厘米的一段木材中(腐爛區)，卻很少或沒有香脂的形成[11]。 這似乎否定了真菌侵染能夠誘導白木香結香的推測，但是該研究小組后來成功 地分離了黃綠墨耳菌(Menanotus?flavolives)并證實該菌可大大加速結香的進 程(戚樹源，林立東，胡厚才.白木香中色酮類化合物的形成[J].中草藥， 2000，31(9)：658-659.廣東省植物研究所.初步揭開沉香結香的秘密[J].植 物學報，1976，18(4)：287-291.戚樹源，陸碧瑤，朱亮鋒，等.白木香中白 木香醛形成的研究(簡報)[J].植物生理學通訊，1992，28(5)：336-339.Rahman M?A，Basak?A?C.Agar?production?in?agar?trees?by?artificial?inoculation?and wounding[J].Bano?Bigan?Patrika，1980，9(1/2)：97-93.)。戚樹源等(戚樹 源，林立東，胡厚才.白木香中色酮類化合物的形成[J].中草藥，2000，31(9)： 658-659.戚樹源，陸碧瑤，朱亮鋒，等.白木香中白木香醛形成的研究(簡報) [J].植物生理學通訊，1992，28(5)：336-339.)對黃綠墨耳菌促進白木香產 生沉香主要成分-白木香醛和色酮類化合的機理進行了研究。他們(戚樹源， 陸碧瑤，朱亮鋒，等.白木香中白木香醛形成的研究(簡報)[J].植物生理學通 訊，1992，28(5)：336-339.)采用GC/MS/DS和掃描電鏡對接種黃綠墨耳菌的 白木香進行研究，研究結果表明：感染真菌1個月的木材組織中，未能檢出白 木香醛及其它沉香倍半萜化合物；1個月后掃描電鏡中觀察到感染真菌產生棕 紅色反應帶的白木香木材組織中的細胞開始崩解死亡，同時產生3種細胞逆境 代謝產物；在感染真菌2個月的木材組織中開始檢出白木香醛，其白木香醛的 含量隨感染真菌的時間而增加。他們推論白木香木材組織細胞不能直接合成白 木香醛等沉香倍半萜化合物，這些倍半萜類化合物的形成可能是感染的真菌對 其細胞逆境代謝產物進一步代謝的結果。他們采用HPLC法檢測白木香受黃綠 墨耳菌感染后，色酮類化合物的形成規律。結果顯示白木香在真菌感染后，開 始形成色酮類化合物，并隨時間不斷增加。從第3個月后含量增加顯著。在此 過程中，沉香中色酮類化合物的相對含量也呈增加趨勢，但不明顯。由于黃綠 墨耳菌為擔子菌類真菌是一種無致病性、專營腐生生活的木材腐朽菌，白木香 并非其天然寄主，菌株在白木香樹干生長非常緩慢，導致結香效率不高且不穩 定。