[發明專利]一種沉香誘導劑及其制備方法

在審

• 申請號: 200910241212.8
• 申請日: 2009-12-02
• 公開（公告）號: CN101731282A
• 公開（公告）日: 2010-06-16
• 發明（設計）人: 魏建和;張爭;楊云;孟慧;高志暉;陳偉平;馮錦東;陳懷瓊
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院藥用植物研究所
• 主分類號: A01N63/04
• 分類號: A01N63/04;A01P21/00
• 代理公司: 北京捷誠信通專利事務所 11221
• 代理人: 魏殿紳

1.一種沉香誘導劑，其特征在于，所述沉香誘導劑包括白木香樹活體莖、PDA培養基、馬鈴薯蔗糖培養基與白木香基質；

所述白木香基質是由以下百分比組分的材料構成：73％白木香樹粉末、25％麩皮、1％蔗糖、0.5％碳酸鈣、0.2％(NH₄)₂HPO₄、0.2％K₂HPO₄、0.1％MgSO₄·7H₂O。

2.根據權利要求1所述的沉香誘導劑的制備方法，其特征在于，所述制備步驟包括：

A對活體莖干進行采樣和分離培養，得到沉香誘導真菌；

B將沉香誘導真菌接種于培養基上，以得到所需接種體；

C將得到的接種體加入到基質中進行培養，形成沉香誘導劑。

3.根據權利要求2所述的沉香誘導劑的制備方法，其特征在于，所述執行步驟B之前還包括：將沉香誘導真菌接種于PDA平板培養基上，并置于黑暗條件溫度為25℃培養5～7天后，進行沉香誘導真菌的形態學鑒定和分子生物學鑒定。

4.根據權利要求2所述的沉香誘導劑的制備方法，其特征在于，所述步驟A具體包括：將白木香樹活體莖上正在形成沉香的部位割下，并經乙醇、升汞消毒后，置于PDA培養、分離、純化進行保存。

5.根據權利要求2所述的沉香誘導劑的制備方法，其特征在于，所述步驟B具體包括：將沉香誘導菌原始菌株接種在PDA活化形成一級接種體，然后接種于馬鈴薯蔗糖液體培養基發酵得到二級接種體。

6.根據權利要求2或5所述的沉香誘導劑的制備方法，其特征在于，所述步驟C具體包括：將活化的二級接種體加入白木香基質中培養，并在30℃恒溫、黑暗、通氣條件下培養3～5天后，形成活性的沉香誘導劑。?

7.根據權利要求2所述的沉香誘導劑的制備方法，其特征在于，所述白木香基質的制作步驟包括：將73％白木香樹粉末、25％麩皮、1％蔗糖、0.5％碳酸鈣、0.2％(NH₄)₂HPO₄、0.2％K₂HPO₄、0.1％MgSO₄·7H₂O進行混合，加水浸泡24～36小時，在121℃、0.11MPa/cm²高溫高壓滅菌1個小時，冷卻后制成白木香基質培養基。

8.根據權利要求5所述的沉香誘導劑的制備方法，其特征在于，所述馬鈴薯蔗糖液體培養基的制作步驟包括：取去皮馬鈴薯200g，切成小塊，加水1000ml煮沸30min后，濾去馬鈴薯塊，將濾液補足至1000ml，加蔗糖20g，瓊脂15g，溶化后分裝，并調pH值至5.5、溫度為121℃、高壓為0.11MPa/cm²下滅菌15min。

9.根據權利要求5所述的沉香誘導劑的制備方法，其特征在于，所述沉香誘導菌菌株為可可毛色二孢菌(Lasiodiplodia?theobromae)。?