[發明專利]一種在細胞核和/或葉綠體中定位表達外源蛋白的方法無效
| 申請號： | 200910235401.4 | 申請日： | 2009-10-13 |
| 公開（公告）號： | CN102040655A | 公開（公告）日： | 2011-05-04 |
| 發明（設計）人： | 李毅;高鋒;魏春紅 | 申請（專利權）人： | 北京大學 |
| 主分類號： | C07K14/14 | 分類號： | C07K14/14;C12N15/46;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/00;C12N15/82;C12R1/94 |
| 代理公司： | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人： | 關暢;任鳳華 |
| 地址： | 100871*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 細胞核 葉綠體 定位 表達 蛋白 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種多肽，其氨基酸序列如序列表的序列1所示。
2.編碼權利要求1所述多肽的DNA片段。
3.如權利要求2所述的DNA片段，其特征在于：所述DNA片段的核苷酸序列如序列表的序列2所示。
4.含有權利要求2或3所述DNA片段的表達盒、重組表達載體、轉基因細胞系或重組菌。
5.如權利要求4所述的重組表達載體，其特征在于：所述重組表達載體是將權利要求2或3所述DNA片段插入載體pRTL2的多克隆位點得到的。
6.一種在植物細胞的細胞核和/或葉綠體中定位表達外源蛋白的方法，是用權利要求1所述多肽作為信號肽引導外源蛋白在植物細胞的細胞核和/或葉綠體中定位表達。
7.如權利要求6所述的方法，其特征在于：所述方法是通過將含有權利要求2或3所述DNA片段和所述外源蛋白的編碼基因的融合DNA導入植物細胞實現的；所述融合DNA中，權利要求2或3所述DNA片段位于所述外源蛋白的編碼基因的上游。
8.如權利要求7所述的方法，其特征在于：所述融合DNA通過如下重組表達載體導入所述植物細胞：骨架質粒為pRTL2，在35S啟動子后的多克隆位點依次插入權利要求2或3所述DNA片段和外源蛋白的編碼基因，得到的重組質粒。
9.如權利要求6至8中任一所述的方法，其特征在于：所述植物細胞為煙草細胞。
10.如權利要求9所述的方法，其特征在于：所述植物細胞為煙草BY2細胞；所述外源蛋白為GFP蛋白。
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