[發(fā)明專利]新生兒溶血病檢測試劑盒的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910234611.1
• 申請日: 2009-11-25
• 公開（公告）號: CN101718784A
• 公開（公告）日: 2010-06-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳玉平;錢國強;朱慶平
• 申請（專利權(quán)）人: 江陰力博醫(yī)藥生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: G01N33/531
• 分類號: G01N33/531;G01N33/80;G01N33/577
• 代理公司: 江陰市同盛專利事務(wù)所 32210
• 代理人: 唐紉蘭

(一)技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種用于血型鑒定血型血清學(xué)檢測試劑盒及其應(yīng)用。更具 體的說，本發(fā)明涉及一種新生兒溶血病檢測試劑盒的組成、制備方法及其 應(yīng)用，涉及輸血醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。

(二)背景技術(shù)

新生兒溶血病(簡稱HDN)是指母嬰血型不合，胎兒和新生兒的紅細(xì) 胞被母親的IgG血型抗體包被，并在嬰兒的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)內(nèi)受到破壞的免 疫性溶血性疾病。

本病的病因是母嬰血型不合。胎兒的血型基因一半來自母親，另一半 來自父親，當(dāng)胎兒由父體遺傳獲得的顯性抗原恰為母體缺乏時，此抗原在 妊娠時通過胎盤進入母體，刺激母體產(chǎn)生相應(yīng)的免疫抗體，此抗體可因再 次懷孕得到刺激而加強。這種抗體的性質(zhì)為免疫性抗體，并且能夠通過胎 盤。一旦這種抗體通過胎盤進入胎兒血循環(huán)，就可能與胎兒紅細(xì)胞上相應(yīng) 抗原結(jié)合，導(dǎo)致紅細(xì)胞發(fā)生溶血現(xiàn)象，引起死胎、流產(chǎn)或早產(chǎn)。出生后表 現(xiàn)為貧血、黃疸，嚴(yán)重會導(dǎo)致心力衰竭及核黃疸。

理論上，凡是以IgG性質(zhì)出現(xiàn)的血型抗體都可以引起新生兒溶血病， 但主要發(fā)生在ABO及Rh系統(tǒng)，其中Rh系統(tǒng)的新生兒溶血病病情較嚴(yán)重。 其它血型系統(tǒng)不合溶血病如Kidd、MN、Duffy等也有報道，但極少見。抗 P1、抗Lea、Leb等屬IgM性質(zhì)，不能通過胎盤，故不會產(chǎn)生HDN。

(1)ABO新生兒溶血病

ABO血型不合新生兒溶血病是由于母嬰ABO血型不合，母體的IgG 抗A或抗B經(jīng)過胎盤進入胎兒血循環(huán)破壞胎兒紅細(xì)胞引起HDN。由于自 然界中廣泛存在著A型和B型物質(zhì)，如寄生蟲感染、預(yù)防接種等都可以使 孕婦產(chǎn)生免疫性抗A及抗B抗體，即孕婦體內(nèi)可以在妊娠前已存在免疫性 抗體，所以ABO系統(tǒng)新生兒溶血病可以在第一胎就發(fā)病。從理論上講，母 /子血型為O/A、O/B、A/B、B/A等組合都有可能使嬰兒發(fā)生HDN，但實 際上90％以上的HDN患兒母親為O型，這與O型母親含有豐富的IgG抗 A(B)抗體有關(guān)。A(B)型母親所生B、AB型(A、AB)新生兒僅少數(shù) 發(fā)生溶血病。IgG抗A(B)抗體效價與溶血程度有一定相關(guān)性，但并非絕 對，這可能與新生兒A、B抗原強弱、型物質(zhì)的含量、胎盤的屏障作用及 IgG亞類不同等有關(guān)，ABO?HDN一般不易作到產(chǎn)前準(zhǔn)確預(yù)報。

但由于ABO?HDN的發(fā)病程度與母體內(nèi)IgG抗A、抗B的效價有一定 相關(guān)性。因此，可以定期檢測孕婦體內(nèi)IgG抗A(B)的效價來判斷胎兒 的受害情況，如果母體內(nèi)IgG抗A(B)效價隨著孕期增加而增長，提示 胎兒受害的可能性增大。患兒出生后第二天出現(xiàn)黃疸，5天達高峰，一般 有貧血，肝脾腫大等癥狀，嚴(yán)重者可引起核黃疸，智力低下或胎兒水腫。

(2)Rh新生兒溶血病

Rh?HDN是由于母嬰Rh血型不合所致的Rh免疫抗體作用于胎兒紅 細(xì)胞造成的高膽紅素血癥。Rh血型抗體只能由人類紅細(xì)胞作為抗原刺激 引起同族免疫作用而產(chǎn)生，Rh?HDN一般可作到產(chǎn)前預(yù)報。

大部分Rh?HDN發(fā)生在母親是Rh陰性的情況，抗體種類有抗D、抗 cD、抗DE、抗CD、抗CDE等，漢族人中大約60％與抗D有關(guān)。

由于新生兒溶血病是新生兒期的常見病之一，因此，對新生兒溶血 病作產(chǎn)前預(yù)報、產(chǎn)后早期診斷以便及時采取防治措施是很重要的。要做 到產(chǎn)前預(yù)報和產(chǎn)后早期診斷就必須對孕婦作正確的免疫學(xué)分析及血型血 清學(xué)檢查。

目前國內(nèi)外HDN的免疫學(xué)分析及血型血清學(xué)檢查項目：

(1)產(chǎn)前預(yù)測

1、夫婦雙方的ABO血型，以及Rh(D)血型

2、女血清滅活I(lǐng)gM抗體后，與男紅細(xì)胞的反應(yīng)。

3、女血清滅活I(lǐng)gM抗體后，與O型篩選紅細(xì)胞的反應(yīng)。

4、女血清滅活I(lǐng)gM抗體后如果存在有意義的IgG抗體，則需要檢 測此抗體效價。

(2)產(chǎn)后檢測

1、母和子的ABO血型，母Rh(D)血型

2、子紅細(xì)胞直接抗人球蛋白試驗

3、子血清中游離抗體檢測

4、子紅細(xì)胞放散液檢測

5、母血清滅活I(lǐng)gM抗體后，針對子紅細(xì)胞上抗原的IgG抗體效價2～ 4項中如果有一項為陽性，則診斷為新生兒溶血病。