[發明專利]新生兒溶血病檢測試劑盒的制備方法

有效

• 申請號: 200910234611.1
• 申請日: 2009-11-25
• 公開（公告）號: CN101718784A
• 公開（公告）日: 2010-06-02
• 發明（設計）人: 陳玉平;錢國強;朱慶平
• 申請（專利權）人: 江陰力博醫藥生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/531
• 分類號: G01N33/531;G01N33/80;G01N33/577
• 代理公司: 江陰市同盛專利事務所 32210
• 代理人: 唐紉蘭

1.一種新生兒溶血病檢測試劑盒的制備方法，其特征在于所述試劑盒 由四張微柱凝膠卡組成，分別為一張HDN產前預測卡I、一張HDN產前預 測卡II、一張HDN產后檢測卡I及一張HDN產后檢測卡II，所述HDN產前 預測卡I具有6個微柱凝膠管，分別是二管含有IgM性質的單克隆抗A抗 體的凝膠管、二管含有IgM性質的單克隆抗B抗體的凝膠管和二管含有IgM 性質的單克隆抗D抗體的凝膠管；所述HDN產前預測卡II具有6個微柱凝 膠管，皆為含有IgG抗體的凝膠管；所述HDN產后檢測卡I具有6個微柱 凝膠管，分別為二管含有IgM性質的單克隆抗A抗體的凝膠管、二管含有 IgM性質的單克隆抗B抗體的凝膠管、一管含有IgM性質的單克隆抗D抗 體的凝膠管和一管含有凝膠懸浮介質的凝膠管；所述HDN產后檢測卡II具 有6個微柱凝膠管，皆為含有IgG抗體的凝膠管，所述方法包括以下工藝 過程：

步驟一、凝膠懸浮介質的配制

所述凝膠懸浮介質配方如下：

以上試劑用蒸餾水溶解，調pH值為6.6-6.8，

步驟二、凝膠的制備

選用聚丙烯酰胺葡聚糖凝膠，顆粒大小為30-60納米，用步驟一配制 的凝膠懸浮介質浸泡后再用該凝膠懸浮介質洗滌3-5次，除去凝膠破損碎 片以及聚集的凝膠顆粒，收集得到顆粒大小均勻的、且完整呈球形的凝膠，

步驟三、抗體的選擇

選擇IgM性質的單克隆抗A抗體，效價≥128

選擇IgM性質的單克隆抗B抗體，效價≥128

選擇IgM性質的單克隆抗D抗體，效價≥64

選擇IgG性質的抗人球蛋白試劑，要求按照體積比1∶2和體積比1∶4 稀釋的IgG抗人球蛋白血清對照體積比1∶16稀釋的抗D?IgG致敏的紅細胞 有肉眼可見凝集，與IgG性質抗D致敏紅細胞產生陽性反應，與無IgG致 敏的紅細胞反應為陰性，

步驟四、凝膠的配制

將步驟二制備的凝膠與步驟三選擇的各抗體均按照體積比2∶1～6∶1 的比例混合，分別配制成含有IgM性質的單克隆抗A抗體的凝膠、含有IgM 性質的單克隆抗B抗體的凝膠、含有IgM性質的單克隆抗D抗體的凝膠和 含有IgG性質的抗人球蛋白凝膠；將步驟二制備的凝膠與步驟一配制的凝 膠懸浮介質按照體積比2∶1～6∶1的比例混合，配制成含有凝膠懸浮介質 的凝膠，

步驟五、分裝

按照每管22-28微升的量，將步驟四配制的各凝膠分別按不同的用途 加入到四張空白卡片的微柱管中，分別形成具有6個微柱凝膠管的HDN產 前預測卡I、具有6個微柱凝膠管的HDN產前預測卡II、具有6個微柱凝 膠管的HDN產后檢測卡I和具有6個微柱凝膠管的HDN產后檢測卡II，從 而組成了一套新生兒溶血病檢測試劑盒。