[發明專利]一種酶解小麥蛋白制備小麥蛋白源阿片活性肽的方法

無效

• 申請號: 200910231736.9
• 申請日: 2009-12-01
• 公開（公告）號: CN101717805A
• 公開（公告）日: 2010-06-02
• 發明（設計）人: 周惠明;孔祥珍;華欲飛;錢海峰
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所 32104
• 代理人: 時旭丹;劉品超

技術領域

本發明涉及一種利用蛋白酶酶解制備小麥蛋白源阿片活性肽的方法，屬于 小麥蛋白深加工技術領域。

背景技術

小麥面筋蛋白俗稱谷朊粉，是小麥淀粉生產的副產品，目前主要用于食品 與飼料工業中，如作為面粉品質改良劑，螃蟹、甲魚等的飼料粘結劑，營養添 加劑等。隨著面筋產量的持續增大，其傳統市場已趨飽和，并造成過剩。因此 開發小麥面筋蛋白的新用途勢在必行。

食物蛋白源生物活性肽是現代營養學及食品學研究的熱點和極具發展前景 的功能因子，近年來受到廣泛重視。目前已從各種食物蛋白的不同酶解產物中 分離鑒定出阿片肽、血管緊張素轉化酶抑制肽(降壓肽)、免疫調節肽、抗菌肽、 抗血栓肽、礦物元素吸收促進肽、降膽固醇肽等。這些活性肽的組成氨基酸并 不一定是必需氨基酸，這使得那些原本認為生物價不高的蛋白質資源能夠得到 更充分地利用，成為能更好滿足人類保健需要的基料。

阿片肽是一類通過與阿片受體結合而發揮阿片樣生理作用的小分子生物活 性肽，具有抗腹瀉，促進攝食，鎮痛，鎮靜，調節睡眠，緩解壓力與緊張，抑 制胃腸道運動和消化液的分泌，促進電解質的吸收，調節內分泌，抑制細胞分 裂和分化，調節免疫功能，影響生殖與泌乳，調節心血管系統等許多生理功能， 而且其毒性遠較嗎啡小，是一類有前途的安全有效的治療藥物。因此，阿片肽 在醫藥及動物生產領域具有非常廣闊的應用前景。

阿片肽分為內源性阿片肽和外源性阿片肽兩種。目前研究較多的外源性阿 片肽主要是來源于食物中蛋白質水解后產生的小肽片段，它們同內源性阿片肽 (EOP)或嗎啡類藥物一樣具有阿片活性，能參與調節動物的生理活動。外源阿 片肽廣泛存在于食物蛋白質序列中，如小麥、大豆、大米、牛奶、血等蛋白序 列中含有許多具有阿片活性的肽段，這些食物在消化過程中釋放出阿片肽，并 可能被小腸完整吸收。它們可刺激胰島素和消化道生長抑素的分泌、調節動物 行為、促進腸道吸收水分和電解質、調節消化道運動、刺激攝食、抑制呼吸和 調整睡眠模式等。

這類外源阿片肽類最早是在酪蛋白酶解產物中被發現的，也是目前研究最 深入的一類。1979年，Brantl等首先報道豚鼠在飼喂一種酪蛋白酶解制劑時， 回腸縱行肌毛細血管中存在一種呈阿片肽活性的物質，命名為β-酪啡肽-7 (β-Casomorphin-7，β-CM-7)，它是含有7個氨基酸殘基的寡肽 (Tyr-Pro-Phe-Pro-Gly-Pro-Ile)，它與μ型受體具有良好的親和力，并呈現出阿片 肽類所具有的特征，如依賴性、呼吸抑制性等。之后又分離得到β-CM-7的前體 β-CM-11(Tyr-Pro-Phe-Pro-Gly-Pro-Ile-Pro-Asn-Ser-Leu)，在多種動物的乳蛋白中 具有保守性。幾種肽鏈較短的β-CM均是十一肽自羧基端水解不同數目的氨基酸 殘基后的產物，它在阿片肽受體分析中顯示很高的親和性。這種肽被認為可能 直接作用于消化道中的阿片肽受體以影響胃腸道的運動或者作為胃腸道激素的 外源性調節劑，也可能在小腸刷狀緣降解成更小的疏水性阿片肽，穿過腸粘膜 進入外周血液，再透過血腦屏障與腦中的阿片肽受體結合，即使是成年人在大 量飲用牛奶后，其小腸內容物中也能檢測到顯著量的這種阿片肽的免疫反應物。

近些年來，研究者對酶法增溶小麥面筋蛋白進行了大量研究，面筋蛋白的 溶解性直接影響著其起泡和乳化等功能特性。但對小麥面筋蛋白源生物活性肽 的研究報道較少，尤其是對于小麥蛋白源阿片肽的制備及其性質還未見報道。

發明內容

本發明提供了一種通過酶水解小麥蛋白制備阿片活性肽的工藝，獲得的肽 含量高，阿片活性高，促進了谷朊粉的綜合利用。

本發明的技術方案：一種酶法制取小麥蛋白源阿片活性肽的方法，所述方 法步驟為：

(1)配制小麥蛋白漿料：以小麥蛋白為原料，加水調至小麥蛋白質量濃度 為5％-6％；

(2)第一步酶解：調整pH值為1.5～2.0，溫度為36～38℃，添加胃蛋白酶 酶解，加酶量為小麥蛋白重量的1.0％～1.5％，酶解時間9～24h；

(3)第二步酶解：再調節pH值為8.3～8.7，添加胰蛋白酶在溫度46～48℃ 酶解或添加胰酶在36～38℃酶解，加酶量為小麥蛋白重量的0.5％～1.0％，酶解 4～6h；