[發明專利]一種中藥板藍根的質量檢測方法

有效

• 申請號: 200910218047.4
• 申請日: 2009-12-21
• 公開（公告）號: CN101716215A
• 公開（公告）日: 2010-06-02
• 發明（設計）人: 劉志強;閆峻;劉舒;皮子鳳;宋鳳瑞;劉忠英
• 申請（專利權）人: 中國科學院長春應用化學研究所
• 主分類號: A61K36/315
• 分類號: A61K36/315;A61P11/04;A61P31/04;A61P31/12;A61P35/00;A61P37/04;G01N27/62;G01N30/02;G01N30/86;A61K125/00
• 代理公司: 長春科宇專利代理有限責任公司 22001
• 代理人: 馬守忠

技術領域

本發明屬于天然藥物化學領域，具體涉及一種中藥板藍根的質量檢測方法，

背景技術

板藍根(RADIXISATIDIS)是十字花科植物菘藍(Isatis?indigotica?Fort.)的干燥根，具有清熱解毒，涼血利咽之功效，用于溫毒發斑，舌絳紫暗，痄腮，喉痹，爛喉丹痧，大頭瘟疫，丹毒，癰腫^[1]，現代藥效學研究表明，板藍根具有抗菌、抗病毒、抗內毒素、免疫增強和抗腫瘤等藥理作用^[2-6]，目前，對板藍根的質量控制方法主要是基于靛藍、靛玉紅等成分的定量分析^[7，8]，不足以從整體上控制板藍根的質量，作為一味臨床常用中藥，其真偽優劣受其產地、采收時間以及干燥條件等諸多因素的影響，因此，有必要建立一種科學的質量檢測方法對板藍根的質量進行評價，(參考文獻：[1]中華人民共和國藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].北京：化學工業出版社，2005：142-143.[2]趙艷玲，曹琳，王伽伯，等.板藍根正丁醇部位指紋圖譜的聚類分析及抑菌活性相關分析[J].中藥材，2005，28(12)：1079-1082.[3]胡興昌，程佳蔚，劉士莊，等.板藍根凝集素效價與抑制感冒病毒作用關系的實驗研究[J].上海中醫藥大學學報，2001，15(3)：238-240.[4]侯琦，程桂芳，張成義，等.4種刺激劑及抗炎藥對HL-60細胞生成IL-8的影響[J].藥學學報，2000，35(3)：173-176.[5]許益民，陸平成，王永珍，等.板藍根多糖促進免疫功能的實驗研究[J].中西醫結合雜志，1991，11(6)：357-359.[6]梁永紅，侯華新，黎丹戎，等.板藍根二酮B體外抗癌活性研究[J].中草藥，2000，31(7)：531-533.[7]羅巍偉，賀英菊，王凌，等.HPLC測定板藍根提取物中靛藍和靛玉紅的含量[J].華西藥學雜志，2004，?19(6)：455-456.[8]王邦林，王強.板藍根、大青葉中靛玉紅、靛藍的高效液相色譜分析[J].天津藥學，1994，69(3)：30-33.)

發明內容

本發明的目的是提供一種中藥板藍根的質量檢測方法，該方法利用中藥板藍根的電噴霧質譜做指紋圖譜，并利用高效液相色譜法測定了中藥板藍根中嘌呤和核苷類成分的含量，保證了中藥板藍根質量檢測方法的科學性和質量檢測的先進性，

本發明利用軟電離質譜技術對中藥板藍根進行檢測，根據得到的中藥板藍根的電噴霧指紋圖譜中特征指紋峰的個數及強度，對中藥板藍根的質量進行初步評價，本發明考慮到中藥板藍根中含有多種嘌呤和核苷類成分，并且以腺嘌呤、尿苷、鳥苷和腺苷為主，因此本發明以這四種成分作為標準對照品，通過高效液相色譜測定，得到各標準對照品對應色譜峰的峰面積，根據標準曲線測定供試樣品中腺嘌呤、尿苷、鳥苷和腺苷含量，完成一種中藥板藍根的質量檢測方法，

實施本發明的技術方案如下：

(1)供試樣品溶液的制備

以板藍根為原料，稱取板藍根藥材飲片2-10g，加40-200mL水分別煎煮兩次，每次1h，過濾，合并濾液，加入濾液3倍體積的乙醇，攪勻，靜置24h，過濾，減壓濃縮并干燥，得到板藍根水提取物，將得到的板藍根水提取物加25-100mL水使溶解，加入25-100mL乙酸乙酯分別萃取3次，合并乙酸乙酯萃取液，減壓濃縮并干燥，殘渣以50％(V/V)甲醇溶解并定容至10mL搖勻，即為供試品溶液1；萃取后的部分加入25-100mL水飽和正丁醇分別萃取3次，合并水飽和正丁醇萃取液，減壓濃縮并干燥，殘渣以50％(V/V)甲醇溶解并定容至10mL，即為供試品溶?液2，

(2)供試樣品的電噴霧指紋圖譜

樣品的電噴霧指紋圖譜通過如下步驟得到：取5-10μL供試品溶液1，用甲醇稀釋至100-500μL，做電噴霧質譜分析，電噴霧質譜實驗條件如下：大氣壓化學電離源，正離子電離方式，放電電流為4.0-5.0μA，氣化溫度350-450℃，流動注入泵進樣流速3-8μL/min，掃描范圍質荷比(m/z)50-1000，在m/z100-300范圍內，存在m/z120、m/z146、m/z149、m/z163、m/z181、m/z187、m/z239、m/z249、m/z263和m/z279離子，

(3)嘌呤和核苷類成分含量測定