[發(fā)明專利]殼聚糖溶液、其制備方法以及應(yīng)用方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910211251.3
• 申請日: 2009-11-05
• 公開（公告）號: CN101698712A
• 公開（公告）日: 2010-04-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王健偉;鐘輝
• 申請（專利權(quán)）人: 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院病原生物學(xué)研究所
• 主分類號: C08L5/08
• 分類號: C08L5/08;C08J3/02;C12N15/861
• 代理公司: 北京北翔知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11285
• 代理人: 張廣育;姜建成

1.一種殼聚糖溶液，其特征在于所述溶液的pH為7.4-14.0，所述 溶液中包括殼聚糖，所述殼聚糖具有75-99%的脫乙酰化，并且所述溶 液中含有NaHCO₃和/或KHCO₃。

2.一種制備權(quán)利要求1所述的殼聚糖溶液的方法，包括下述步驟：

1）將殼聚糖溶于酸性溶液中；

2）然后利用NaHCO₃和/或KHCO₃溶液進(jìn)行快速中和，將酸性殼 聚糖溶液中和至pH中性或堿性；以及

3）再加入與殼聚糖相容的酸性或堿性溶液將所述溶液的pH值調(diào) 節(jié)至pH7.4～14.0之間的任一所需值，其中所述與殼聚糖相容的酸性溶 液包括鹽酸、己二酸、醋酸、甲酸、乳酸、蘋果酸、丙酸和琥珀酸， 其中所述與殼聚糖相容的堿性溶液包括碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫氧化 鉀和氫氧化鈉，

從而實現(xiàn)殼聚糖或其衍生物在pH7.4～14.0條件下的溶解。

3.權(quán)利要求2所述的方法，其中所述酸性溶液包括己二酸、鹽酸、 醋酸、甲酸、乳酸、蘋果酸、丙酸和琥珀酸的酸性溶液，以及它們的 混合物。

4.權(quán)利要求2或3所述的方法，其中所述酸性殼聚糖溶液中殼聚 糖的濃度范圍為0.1mg/L～100g/L。

5.一種應(yīng)用殼聚糖溶液促進(jìn)重組腺病毒載體基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的方 法，包括下述步驟：將權(quán)利要求1所述的殼聚糖溶液與重組腺病毒載 體溶液混合，然后將混合物用于對細(xì)胞進(jìn)行基因轉(zhuǎn)導(dǎo)，其中所述細(xì)胞 選自離體的永生化的細(xì)胞系和原代培養(yǎng)的細(xì)胞系。

6.權(quán)利要求5所述的方法，其中所述用于混合所述殼聚糖溶液和 重組腺病毒載體溶液的工作液是水、緩沖液或培養(yǎng)基。

7.權(quán)利要求5所述的方法，其中所述殼聚糖溶液與重組腺病毒載 體溶液混合后殼聚糖的濃度是0.1mg/L～5g/L。

8.權(quán)利要求5所述的方法，其中所述殼聚糖溶液與重組腺病毒載 體溶液混合后的混合物的pH值是6.8～9.0，且所述殼聚糖、重組腺病 毒混合物與細(xì)胞相互作用的液體環(huán)境的pH值是6.8～9.0。

9.權(quán)利要求1所述的殼聚糖溶液用于制備促進(jìn)重組腺病毒載體基 因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的溶液的用途。