[發明專利]一種抗原遞呈細胞靶向納米粒子及其制備方法

無效

• 申請號: 200910201415.4
• 申請日: 2009-12-18
• 公開（公告）號: CN101716345A
• 公開（公告）日: 2010-06-02
• 發明（設計）人: 崔京浩;陳莉;朱麗
• 申請（專利權）人: 蘇州大學
• 主分類號: A61K47/36
• 分類號: A61K47/36;A61K47/26;A61K38/38;A61K38/25;A61K38/24;A61K38/21;A61K38/20;A61K38/19;A61K38/09
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1.一種抗原遞呈細胞靶向納米粒子及其制備方法，其特征在于該納米粒是甘露糖通過化學反應形成化學鍵連接到殼聚糖上，再采用復乳法(W/O/W)制備PLGA納米粒。

2.根據權利要求1所述的抗原遞呈細胞的靶向載體，其特征在于通過該法制得的納米粒粒徑在200-500nm之間，分布較窄，載藥量約為6-10％，具有明顯的靶向抗原遞呈細胞和緩釋性能。

3.根據權利要求1-2所述的納米粒子，其特征在于殼聚糖的分子量為8000-10000道爾頓，脫乙酰度大于90％；PLGA，分子量為20000-40000道爾頓，PLA∶PGA比例為：50∶50-25∶75，PLGA濃度為10mg/mL-50mg/mL；甘露糖修飾的殼聚糖的濃度為0.5％-5％。

4.根據權利要求1-3所述的抗原遞呈細胞的靶向納米粒，其特征在于包裹的藥物為多肽及蛋白類藥物或腫瘤治療疫苗等，包括：白蛋白、促黃體激素、曲普瑞林、亮丙瑞林、布舍瑞林、生長激索釋放因子、促甲狀腺激索釋放激索、白細胞介素(IL)-2、IL-3、IL-4、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、α-干擾素、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、粒細胞單核細胞集落刺激因子(GM-CSF)中的一種或多種混合物。

5.根據權利要求1-3所述的巨噬細胞的靶向納米粒，其特征在于其制備方法如下：

(1)將含有蛋白質的溶液(內水相)，加入到PLGA的有機溶液中，用超聲波細胞粉碎儀超聲乳化，得到初乳(W₁/O)；

(2)然后將初乳加入PVA中，再乳化，得到內水相含OVA的復乳(W₁/O/W₂)；

(3)復乳注入到含有甘露糖修飾的殼聚糖的PVA中，于室溫下揮發有機溶劑；

(4)離心，收集沉淀，加入凍干保護劑，冷凍干燥。

6.根據權利要求1-3所述的巨噬細胞的靶向納米粒，其特征在于該納米粒是甘露糖通過化學反應連接到殼聚糖上，具體合成包括以下步驟：

(1)D-甘露糖與乙酸酐、氯化鋅，加熱反應，生成全乙酰化甘露糖(產物1)；

(2)全乙酰化甘露糖與溴代試劑中，室溫攪拌，得到溴代四乙酰甘露糖(產物2)；

(3)溴代四乙酰甘露糖與羥基苯甲醛、四正丁基溴化銨反應，得1-對羥基苯基四乙酰甘露糖(產物3)；

(4)將1-對羥基苯基四乙酰甘露糖(產物3)懸浮于無水乙醇中，加入乙醇鈉溶液，加熱回流，得1-對羥基苯基甘露糖(產物4)；

(5)殼聚糖溶入乙酸溶液，攪拌下慢慢滴加產物4，繼續反應，得淡黃色粉末狀固體產物，把得到的上述產物倒入乙醇和水的混合溶液中，加入硼氫化鈉，攪拌反應，最后加入丙酮，再反應，得淡黃色粉末狀固體產物，即為甘露糖修飾的殼聚糖(產物5)。

7.根據權利要求5所述的有機溶劑，其特征在于優選乙酸乙酯，體積為2-5mL。

8.根據權利要求5所述的凍干保護劑，其特征在于選擇乳糖、甘露醇或者蔗糖中的一種或兩種以上，含量為2-10％。

9.根據權利要求5所述的抗原遞呈細胞的靶向納米粒，其特征在于內水相體積為100-250μL，pH值為3-7，PVA濃度為1％-5％；外水相PVA的水解度為87％-90％，分子量為17000道爾頓，溶度為1％-7％，與有機溶劑的比例為1∶3-1∶7。

10.根據權利要求5所述的抗原遞呈細胞的靶向納米粒，其特征在于超聲使用超聲波細胞粉碎儀，超聲功率為200-600W。