[發(fā)明專(zhuān)利]生物酶法改性甲殼素漿料的制備方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200910201410.1
• 申請(qǐng)日: 2009-12-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101736583A
• 公開(kāi)（公告）日: 2010-06-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 郭建生;申芳;李朝麗;田心杰;陳秀苗
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 東華大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): D06M15/03
• 分類(lèi)號(hào): D06M15/03;C12P19/04;C12R1/66
• 代理公司: 上海申匯專(zhuān)利代理有限公司 31001
• 代理人: 翁若瑩

1.一種生物酶法改性甲殼素漿料的制備方法，其特征在于是由如下步驟實(shí)現(xiàn)的：

步驟一：甲殼素脫乙酰酶種子培養(yǎng)液的制備

(1)甲殼素脫乙酰酶種子培養(yǎng)液的配方，配方中各組分的重量百分比如下：

(2)甲殼素脫乙酰酶種子培養(yǎng)液的制備：

①按甲殼素脫乙酰酶種子培養(yǎng)液的配方分別稱(chēng)取各組分并加入燒杯中，在溫度為50℃條件下將其加熱溶解；

②用0.1mol/L的NaOH溶液調(diào)節(jié)上述①中所得溶液的pH值至7.0～7.2，然后將其裝于250mL錐形瓶中先后用八層脫脂紗布和八層紙包扎瓶口；

③將上述錐形瓶放在立式壓力蒸汽滅菌鍋內(nèi)，在溫度為121℃和壓力為0.1MPa的條件下，通過(guò)濕熱滅菌20min，滅菌后將其置于無(wú)菌工作臺(tái)上，用紫外燈照射20min；

④打開(kāi)立式壓力蒸汽滅菌鍋取出上述錐形瓶，打開(kāi)瓶口，取一環(huán)構(gòu)巢曲霉菌接種于上述③所得的溶液中，先后用八層脫脂紗布和八層紙包扎瓶口，并置于溫度為30℃，轉(zhuǎn)速為200r/min的搖床上，培養(yǎng)42～54h，以制得?甲殼素脫乙酰酶種子培養(yǎng)液。

步驟二：甲殼素脫乙酰酶的制備

(1)甲殼素脫乙酰酶培養(yǎng)基的配方，配方中各組分的重量百分比如下：

(2)甲殼素脫乙酰酶的制備：

①按甲殼素脫乙酰酶培養(yǎng)基的配方分別稱(chēng)取各組分并加入燒杯中，在溫度為50℃條件下將其加熱溶解；

②用0.1mol/L的NaOH溶液調(diào)節(jié)上述①中所得溶液的pH值至5.5～6.5，然后將其裝于250mL錐形瓶中先后用八層脫脂紗布和八層紙包扎瓶口；

③將上述錐形瓶放在立式壓力蒸汽滅菌鍋內(nèi)，在溫度為121℃和壓力為0.1MPa的條件下，通過(guò)濕熱滅菌20min，滅菌后將其置于無(wú)菌工作臺(tái)上，用紫外燈照射20min，取出冷卻后按體積比5～10％直接接入上述步驟一中制得的甲殼素脫乙酰酶種子培養(yǎng)液，以制得甲殼素脫乙酰酶培養(yǎng)基；

④將上述③中制得的甲殼素脫乙酰酶培養(yǎng)基置于溫度為31℃，轉(zhuǎn)速為150r/min的搖床上，培養(yǎng)72～108h，以制得甲殼素脫乙酰酶。

步驟三：生物酶法改性甲殼素漿料的制備?

①稱(chēng)取甲殼素20～50g，溶解于存放400mL濃度為20～30％的NaOH溶液的燒杯中，在溫度為95～98℃的條件下反應(yīng)30～40min；

②用去離子水將上述①中的溶液洗至中性pH為7，用真空泵抽濾，制得可用生物酶處理的甲殼素脫乙酰酶底物；

③將步驟二制得的甲殼素脫乙酰酶加入到上述②中制得的甲殼素脫乙酰酶底物中，在pH值為4.0～4.5，反應(yīng)溫度為45℃～55℃，酶用量為15～25mL，反應(yīng)時(shí)間為12～36h的條件下，最終制得生物酶法改性甲殼素漿料，其生物酶法改性后的甲殼素大分子結(jié)構(gòu)式為：

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