[發明專利]G-CSF融合蛋白突變體及其制備與應用

有效

• 申請號: 200910199337.9
• 申請日: 2009-11-25
• 公開（公告）號: CN101824091A
• 公開（公告）日: 2010-09-08
• 發明（設計）人: 溫曉芳;吳亦亮;王葉飛;楊志愉;范敏;王玉姣;方曉春;陸游
• 申請（專利權）人: 泰州貝今生物技術有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/63;C12N1/19;C12N5/10;C12P21/02;A61K38/19;A61K47/48;A61P7/00;C12R1/84;C12R1/865
• 代理公司: 上海光華專利事務所 31219
• 代理人: 許亦琳;余明偉

1.一種G-CSF融合蛋白突變體，為具有刺激中性粒細胞增殖活性的融合蛋白，其結構為 G-CSF/載體蛋白或載體蛋白/G-CSF，其中，G-CSF部分與SEQ?ID?NO：1相比，突變為 K34H,L35I,K40H及L41I突變中的任一種，或者為K34H與L35I突變組合、K34H與 K40H突變組合、K34H與及L41I突變組合、L35I與K40H突變組合、L35I與L41I突變 組合、K40H與L41I突變組合中的任一種，或者為K34H,L35I,K40H,L41I,T1A,L3T,G4Y 及P5R突變組合，所述載體蛋白選自人血清白蛋白。

2.如權利要求1所述G-CSF融合蛋白突變體，其特征在于，所述G-CSF部分氨基酸序列為 SEQ?ID?NO:2。

3.如權利要求1所述G-CSF融合蛋白突變體，其特征在于，所述G-CSF融合蛋白突變體氨 基酸序列為SEQ?ID?NO:4。

4.一種多核苷酸，其特征在于，所述的多核苷酸編碼如權利要求1所述G-CSF融合蛋白突 變體。

5.一種含有權利要求4所述的多核苷酸的序列的表達載體。

6.一種重組的宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞含有權利要求5所述的表達載體、或 者染色體中整合有權利要求4所述的多核苷酸。

7.一種制備權利要求1所述G-CSF融合蛋白突變體的方法，該方法包括：合成含有能表達 權利要求1所述G-CSF融合蛋白突變體的核苷酸序列，將此核苷酸序列構建至表達載體 中，然后將含有融合蛋白基因序列的表達載體轉化至宿主細胞中誘導表達，通過親和層 析、離子交換層析和疏水層析制備這種融合蛋白。

8.一種藥物組合物，含有權利要求1所述G-CSF融合蛋白突變體及至少一種藥學可接受的 載體或賦形劑。

9.權利要求1-3中任一權利要求所述G-CSF融合蛋白突變體在制備治療中性粒細胞減少癥 或白細胞減少癥的藥物中的應用。