[發明專利]一種適冷木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶、其制備方法及應用

有效

• 申請號: 200910198068.4
• 申請日: 2009-10-30
• 公開（公告）號: CN102051350A
• 公開（公告）日: 2011-05-11
• 發明（設計）人: 呂紅;周峻崗;袁漢英
• 申請（專利權）人: 復旦大學
• 主分類號: C12N9/42
• 分類號: C12N9/42;C12N15/56;C12N15/63;C12N1/21;C12N1/19;C12N1/15;C12N5/10;A23K1/165;C12P7/10;C12P19/14;C12R1/19;C12R1/865;C12R1/84;C12
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司 31200
• 代理人: 吳桂琴;包兆宜

1.一種木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶雙功能酶，其特征是，其氨基酸序列如SEQID?NO.2所示。

2.如權利要求1所述的木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶雙功能酶，其特征是，它的核苷酸編碼序列如SEQ?ID?NO.1所示。

3.一種含有權利要求1所述的木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶雙功能酶的核苷酸編碼序列的重組載體。

4.如權利要求3所述的重組載體，其特征是，該重組載體是大腸桿菌表達載體、釀酒酵母表達載體、畢赤酵母表達載體、枯草芽孢桿菌表達載體、乳酸菌表達載體、絲狀真菌表達載體、昆蟲表達載體或者哺乳動物細胞表達載體中的任意一種。

5.一種含有權利要求3所述的重組載體的重組菌株。

6.如權利要求5所述的重組菌體，其特征是，該菌株的宿主細胞是大腸桿菌、釀酒酵母、畢赤酵母、枯草芽孢桿菌、乳酸菌、絲狀真菌、昆蟲或者哺乳動物細胞中的任意一種。

7.如權利要求1所述的木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶雙功能酶的制備方法，包括培養重組菌株和分離目標蛋白，其特征是該制備方法依次包括以下步驟：

(1)利用引物進行聚合酶反應擴增，獲得權利要求1所述的木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶雙功能酶的核苷酸編碼序列，構建木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶雙功能酶重組表達載體；

(2)將重組表達載體導入表達宿主細胞，在重組菌體表達木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶雙功能酶；

(3)分離回收木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶雙功能酶。

8.如權利要求1所述的木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶雙功能酶的制備方法，其特征是按照SEQ?ID?NO.2所示序列人工合成所述的木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶雙功能酶。

9.權利要求1所述的木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶雙功能酶在飼料組合物的制備、半纖維素或阿拉伯木聚糖的糖化或乙醇生產方面的用途。

10.一種含有木聚糖酶和權利要求1所述的木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶雙功能酶的組合物。