[發(fā)明專利]葡萄糖苷酶/木糖苷酶雙功能纖維素降解酶RuBGX2及其編碼基因和應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910197703.7
• 申請日: 2009-10-26
• 公開（公告）號: CN102041251A
• 公開（公告）日: 2011-05-04
• 發(fā)明（設計）人: 呂紅;包蕾;周峻崗;袁漢英;詹志春
• 申請（專利權）人: 復旦大學;武漢新華揚生物股份有限公司
• 主分類號: C12N9/42
• 分類號: C12N9/42;C12N15/56;C12N15/63;C12P19/14;C12R1/645;C12R1/01;C12R1/685;C12R1/125;C12R1/84;C12R1/865;C12R1/19
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司 31200
• 代理人: 吳桂琴;包兆宜

1.一種β-葡萄糖苷酶/木糖苷酶雙功能纖維素酶，其特征在于，該β-葡萄糖苷酶/木糖苷酶雙功能纖維素酶的多肽序列含有SEQ?ID?NO.2的第18-755位的氨基酸殘基序列。

2.如權利要求1所述的β-葡萄糖苷酶/木糖苷酶雙功能纖維素酶，其特征在于，該β-葡萄糖苷酶/木糖苷酶雙功能纖維素酶的多肽序列如SEQ?IDNO.2所示。

3.如權利要求1所述的β-葡萄糖苷酶/木糖苷酶雙功能纖維素酶的編碼基因，其特征在于，其核苷酸編碼序列含有SEQ?ID?NO.1中第52-2265位的DNA序列。

4.如權利要求3所述的編碼基因，其特征在于，其核苷酸編碼序列如SEQ?ID?NO.1所示。

5.權利要求1所述的β-葡萄糖苷酶/木糖苷酶雙功能纖維素酶的制備方法，其特征在于，按照SEQ?ID?NO.2的第18-755位的氨基酸序列人工合成即可。

6.權利要求1所述的β-葡萄糖苷酶/木糖苷酶雙功能纖維素酶的制備方法，其特征在于，取牦牛的瘤胃內容物，構建瘤胃未培養(yǎng)細菌宏基因組文庫；篩選具備β-葡萄糖苷酶/木糖苷酶雙功能纖維素酶活性的陽性克隆；通過構建亞克隆、同源對比方法獲得β-葡萄糖苷酶/木糖苷酶雙功能纖維素酶的編碼基因；將該編碼基因克隆入重組表達載體，導入宿主細胞，獲得重組表達的β-葡萄糖苷酶/木糖苷酶雙功能纖維素酶。

7.如權利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述的重組表達載體是大腸桿菌表達載體，酵母表達載體、枯草桿菌表達載體、乳酸菌表達載體、絲狀真菌表達載體、昆蟲表達載體或者哺乳動物細胞表達載體中的任意一種。

8.如權利要求6所述的制備方法，其特征在于，所述的宿主細胞是Escherichia?coliBL21、E.coli?JM109、E.coli?DH5α、Saccharomycescerevisiae、Pichiapastoris、Kluyveromyces?lactis、Bacillus?subtilisR25、Bacillus?subtilis?9920、Lactic?acidbacteria?COCC101、Trichodermaviride，Trichoderma?reesei、Aspergillus?niger、Bombyx?mori、Antharaeaeucalypti、CHO或者CHL細胞中的任意一種。

9.權利要求1所述的β-葡萄糖苷酶/木糖苷酶雙功能纖維素酶的應用，其特征在于，將其用于纖維素降解。