[發明專利]鉑類藥物療效相關基因mRNA表達檢測液相芯片和檢測方法

有效

• 申請號: 200910193800.9
• 申請日: 2009-11-10
• 公開（公告）號: CN101698886A
• 公開（公告）日: 2010-04-28
• 發明（設計）人: 許嘉森;郭元杰;羅彩英;吳詩揚;楊惠夷
• 申請（專利權）人: 廣州益善生物技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;G01N21/64
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 萬志香;曾旻輝

技術領域

本發明屬于分子生物學領域，涉及醫學和生物技術，具體的是涉及鉑類藥物療效相關基 因mRNA表達檢測液相芯片和檢測方法。

背景技術

鉑類是目前常用的廣譜抗腫瘤藥，已成為癌癥化療中不可缺少的藥物。目前已發展出以 卡鉑為代表的第二代，和以奧沙利鉑為代表的第三代鉑類藥物。鉑類藥物的抗腫瘤作用是通 過作用于DNA，形成Pt-DNA結合物，導致DNA的鏈內和鏈間交聯，從而抑制DNA的合成及 復制。鉑類藥物的療效雖得到廣泛認可，但患者用藥后藥效的個體差異很大、且有不同程度 的毒副作用。其副作用主要是消化系統毒性，常見為惡心、嘔吐，還可有腎毒性、肝毒性和 骨髓抑制，耳毒性和神經毒性較輕。

大量的臨床研究已經證實，鉑類藥物的療效/毒副作用與患者體內核苷酸切除修復交叉互 補組1(ERCC1)、遺傳性乳腺癌和卵巢癌易感基因BRCA1的表達水平關系密切。 (1)鉑類藥物與核苷酸切除修復交叉互補組1(ERCC1)

ERCC1是核酸外切修復家族中重要成員，參與DNA鏈的切割和損傷識別。缺失有功能 ERCC1的腫瘤細胞不能修復順鉑導致的DNA損傷而死亡；反之，ERCC1?mRNA高表達則導 致鉑類藥物的耐藥。研究表明手術切除的中晚期非小細胞肺癌中ERCC1低表達接受吉西他濱 和順鉑聯合化療后生存期明顯延長，同時ERCC1表達陰性的肺癌患者接受輔助性化療顯著 受益。另外，進展期非小細胞肺癌中ERCC1?mRNA低表達的患者中位生存期明顯高于高表 達者。研究已證實ERCC1參與非小細胞肺癌鉑類化療藥物耐藥發生，與肺癌療效和生存期呈 負相關；ERCC1?mRNA低表達者對含鉑類化療藥的輔助化療顯示良好的獲益率，因而ERCC1 mRNA的表達水平可作為鉑類藥物耐藥的關鍵指標之一。

(2)鉑類藥物、抗微管類藥物與遺傳性乳腺癌和卵巢癌易感基因BRCA1

鉑類化合物是最常使用的腫瘤化療藥物，由于鉑類藥物通過廣泛結合DNA而抑制細胞 分裂實現抗癌目的，因此鉑類藥物的使用不可避免地損傷患者機體內正常分裂細胞，造成毒 副作用。大量臨床研究已經證實：鉑類藥物的療效與腫瘤組織中BRCA1基因mRNA表達水 平密切相關，即BRCA1基因表達水平低的患者對鉑類藥物敏感，反之表達水平高的患者表 現耐藥。

抗微管類化療藥是作用于細胞微管，通過影響紡錘體形成，從而抑制細胞有絲分裂的一 類化療藥。抗微管類藥物的抗癌譜很廣，是使用最為廣泛的抗腫瘤藥物。但在臨床應用中， 卻時常出現治療有效率低和副作用大的問題，而且存在顯著的個體差異。大量的臨床研究顯 示，抗微管藥物的療效與腫瘤組織中BRCA1基因的mRNA表達水平密切相關，即BRCA1基 因表達水平高的患者對抗微管類藥物敏感，反之表達水平低的患者表現耐藥。

在對卵巢癌患者的臨床研究中顯示，BRCA1的mRNA表達水平與鉑類和紫杉醇治療的 療效相關。BRCA1的mRNA低表達和中等表達的患者接受鉑類化療后的生存期比高表達患 者顯著增長，而在BRCA1?mRNA高表達的患者中，接受紫杉醇/鉑類化療的比只接受鉑類化 療的患者生存期延長。

(3)持家基因β2-微球蛋白(B2M)、鐵傳遞蛋白受體(TFRC)和TATA框結合蛋白(TBP)

持家基因一般在體內可穩定表達，但由于這種穩定表達是相對的，在一定的病理狀態或 用藥情況下，某些常用的持家基因的表達也會發生變化。選擇在我們所研究對象中穩定表達 的基因作持家基因，對保證檢測結果的準確性至關重要。因此，本發明從一定數量的常用持 家基因中進行篩選，確定3個合適的持家基因，分別是：β2-微球蛋白(B2M)、鐵傳遞蛋白 受體(TFRC)、TATA框結合蛋白(TBP)。

基于以上基因的表達水平與鉑類藥物療效的相關性，專家推薦患者在接受鉑類藥物治療 之前，應當進行相關的基因mRNA表達水平的檢測，幫助臨床醫生根據患者的個體差異制定 個體化用藥方案，以提高藥物療效，減少藥物毒副作用的發生。