[發(fā)明專利]軍曹魚精子超低溫保存方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200910193584.8 | 申請日: | 2009-10-28 |
| 公開(公告)號: | CN101711522A | 公開(公告)日: | 2010-05-26 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 湯保貴;陳剛;張建東;周暉;施鋼;潘傳豪;黃建盛 | 申請(專利權(quán))人: | 廣東海洋大學(xué) |
| 主分類號: | A01N1/02 | 分類號: | A01N1/02;A01K61/00;C12N5/076 |
| 代理公司: | 湛江市三強專利事務(wù)所 44203 | 代理人: | 龐愛英 |
| 地址: | 524025 廣東省*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 軍曹魚 精子 超低溫 保存 方法 | ||
1.一種軍曹魚精子超低溫保存方法,其特征是將采集的新鮮精液按體積比1∶3的比例與精子保存液逐步稀釋并混和均勻,在20秒內(nèi)完成,然后平置于液氮液面上預(yù)冷5分鐘,預(yù)冷溫度-70~-80℃,然后再放入-196℃的液氮中長期保存;使用時將保存的精子在37~40℃溫度下解凍,時間3~4秒,再移入精子活化液中活化,然后進行授精。
2.據(jù)權(quán)利要求1所述軍曹魚精子超低溫保存方法,其特征是所述精子保存液的配方及配制方法:
精子保存基液的配方:NaCl?65~75mmol/l、KCl?1.45~1.5mmol/l、CaCl22.5~2.7mmol/l、NaHCO3?20~25mmol/l、MgCl2?5.7~6.1mmol/l、葡萄糖150~200mmol/l;小牛血清9.4~10mg/ml,按配方制備精子保存基液,然后調(diào)PH值至7.8,再加入9~10%體積的抗凍劑,得到精子保存液。
3.據(jù)權(quán)利要求1所述軍曹魚精子超低溫保存方法,其特征是所述活化液配方為:NaCl?7.6~8g/l,KCl?0.4~0.45g/l,CaC12·2H2O?0.18~0.19g/l,NaHCO3?0.35~0.4g/l?MgSO4?0.09~0.10g/l,KH2PO4?0.06~0.07g/l,Na2HPO40.045~0.05g/l,D-glucose?0.8~1.2g/l。
4.據(jù)權(quán)利要求3所述軍曹魚精子超低溫保存方法,其特征是所述活化液配方為:NaCl?8g/l,KCl?0.4g/l,CaC12·2H2O?0.185g/l,NaHCO3?0.35g/l,MgSO4?0.098g/l,KH2PO4?0.06g/l,Na2HPO4?0.048g/l,D-glucose?1g/l。
5.據(jù)權(quán)利要求2所述軍曹魚精子超低溫保存方法,其特征是所述抗凍劑為二甲亞楓。
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