[發明專利]檢測何首烏中二苯乙烯苷和蒽醌類成分的毛細管電泳方法

無效

• 申請號: 200910192208.7
• 申請日: 2009-09-09
• 公開（公告）號: CN101658559A
• 公開（公告）日: 2010-03-03
• 發明（設計）人: 吳虹;葉秋芳;宗敏華
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: A61K36/704
• 分類號: A61K36/704;A61P1/14;A61P17/00;G01N30/02;G01N30/58;A61K125/00
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司
• 代理人: 裘 暉

1.一種同時分離檢測何首烏中二苯乙烯苷和蒽醌類成分的毛細管電泳方法，其特征在于：包括如下步驟：

(1)將二苯乙烯苷對照品、大黃素對照品、蘆薈大黃素對照品、大黃酸對照品、大黃酚對照品和大黃素甲醚對照品溶于甲醇中，制成上述各種對照品濃度均為50μg/mL的對照品混合液；采用膠束電動毛細管色譜法，在最佳檢測條件下，對對照品混合液進行毛細管電泳分析，獲得對照品混合液的電泳圖譜；

(2)采用膠束電動毛細管色譜法，在最佳檢測條件下，對何首烏樣品提取液進行毛細管電泳分析，獲得樣品液的電泳圖譜；所述何首烏樣品提取液是按以下操作步驟進行：將何首烏的干燥塊根粉碎，過80～120目篩，取粉末0.2～1.0g，加入甲醇30～60mL，用甲醇超聲提取15～30min，過濾，得濾液和濾渣；將濾渣用5～15mL甲醇洗滌2～4次，將洗滌液和上述濾液合并，減壓蒸發除去溶劑后加入5mL甲醇溶解，搖勻，經0.22μm濾膜過濾，得到何首烏樣品提取液；

(3)分別根據二苯乙烯苷、大黃素、蘆薈大黃素、大黃酸、大黃酚或大黃素甲醚的校正曲線方程，根據步驟(2)所得電泳圖譜中各對應物質峰面積，計算出何首烏提取液中二苯乙烯苷、大黃素、蘆薈大黃素、大黃酸、大黃酚或大黃素甲醚的濃度；

所述最佳檢測條件是：內徑為75μm、有效長度為50cm的未涂層熔融石英毛細管、電泳緩沖液組成為15mmol/L硼砂-30mmol/L十二烷基硫酸鈉-體積比10％甲醇、pH為9.6、分離電壓為25kV、檢測溫度為25℃、進樣壓力為0.5psi、進樣時間為10秒和檢測波長為254nm。

2.根據權利要求1所述的一種同時分離檢測何首烏中二苯乙烯苷和蒽醌類成分的毛細管電泳方法，其特征在于：所述超聲提取是采用60W的超聲提取。

3.根據權利要求1所述的一種同時分離檢測何首烏中二苯乙烯苷和蒽醌類成分的毛細管電泳方法，其特征在于：對毛細管進行以下處理：

(1)毛細管在第一次使用前，按以下的程序進行預處理：先用甲醇沖洗10min，去離子水沖洗2min，接著用0.1mol/L鹽酸沖洗10min，去離子水沖洗2min，最后用0.1mol/L氫氧化鈉溶液沖洗10min，去離子水沖洗2min；

(2)每次操作之前，毛細管依次分別用0.1mol/L鹽酸、去離子水、0.1mol/L氫氧化鈉、去離子水沖洗5min，然后再用電泳緩沖液沖洗5min。