[發明專利]一種利用LAMP檢測溶珊瑚弧菌的引物組、快速診斷試劑盒及檢測方法無效
| 申請號： | 200910192203.4 | 申請日： | 2009-09-09 |
| 公開（公告）號： | CN101691613A | 公開（公告）日： | 2010-04-07 |
| 發明（設計）人： | 王江勇;王瑞旋;劉廣鋒 | 申請（專利權）人： | 中國水產科學研究院南海水產研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/63 |
| 代理公司： | 廣州知友專利商標代理有限公司 44104 | 代理人： | 宣國華 |
| 地址： | 510300 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 利用 lamp 檢測 珊瑚 弧菌 引物 快速 診斷 試劑盒 方法 | ||
1.一種利用LAMP檢測溶珊瑚弧菌的引物組，其特征在于，所述的引物組由下 述外引物對和內引物對組成：
所述的外引物對為：
VCF3：TGGTTGCAGGTGACATCAC
VCB3：TCTACTGGGCTGTACGTAGC
所述的內引物對為：
VCFIP：CATWGCGATCTCAGCGTTGTCTITTGATCGCTAACCCAGAACACG
VCBIP：TGGTTACGTTCCAGCTTCAGCTTTCAACCAGTAGGCGACCRAT
其中W＝A和T；R＝A和G。
2.一種利用LAMP檢測溶珊瑚弧菌的快速診斷試劑盒，其特征在于，它含有權 利要求1所述的引物組、陽性對照品、LAMP反應液、Bst?DNA聚合酶和顯色液。
3.根據權利要求2所述的快速診斷試劑盒，其特征在于，所述引物組中外引物 對和內引物對的添加摩爾比為1∶1～10。
4.根據權利要求2所述的快速診斷試劑盒，其特征在于，所述LAMP反應液含 有1×反應緩沖液、1.0mmol/LdNTPs、0.2～1.0mmol/L甜菜堿和0.2～0.8mmol/L MgSO4。
5.根據權利要求4所述的快速診斷試劑盒，其特征在于，所述的1×反應緩沖 液含有20mmol/L?pH為8.8的Tris-HCl、10mmol/L?KCl、10mmol/L(NH4)2SO4、 2mmol/L?MgSO4和占反應緩沖液體積百分比為0.1％Triton?X-100。
6.根據權利要求2所述的快速診斷試劑盒，其特征在于，所述的顯色液為含熒 光染料，所述的熒光染料為SYBR?Green?I或EvaGreen。
7.根據權利要求2所述的快速診斷試劑盒，其特征在于，所述的陽性對照品為 含有溶珊瑚弧菌的基因組DNA。
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