[發(fā)明專利]同時(shí)檢測乙型肝炎病毒三種核苷酸類似物耐藥位點(diǎn)的方法及其試劑盒

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910191239.0
• 申請日: 2009-10-27
• 公開（公告）號: CN101812537A
• 公開（公告）日: 2010-08-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃愛龍;張文露;胡源;賴國旗;劉彥辰;趙麗
• 申請（專利權(quán)）人: 重慶醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93
• 代理公司: 重慶市前沿專利事務(wù)所 50211
• 代理人: 郭云

1.一種在檢測乙型肝炎病毒三種核苷酸類似物耐藥位點(diǎn)中用于PCR反應(yīng)擴(kuò) 增的地高辛標(biāo)記的引物，其特征在于：

外引物是：

HBV?570F??5’-TGTTGCTGTACAAAACCT-3’SEQ?NO?1

HBV?1180R??5’-TCAGCAAACACTTGGCA-3’SEQ?NO?2

內(nèi)引物是：

HBV?610F??5’-TGTATTCCCATCCCATCATC-3’SEQ?NO?3

HBV?998R??5’-CCCARAAGMCCCACAATTC-3’SEQ?NO?4。

2.如權(quán)利要求1所述的在檢測乙型肝炎病毒三種核苷酸類似物耐藥位點(diǎn) 中用于PCR反應(yīng)擴(kuò)增的地高辛標(biāo)記的引物，其特征是地高辛的標(biāo)記數(shù)是5’端3 個(gè)。

3.一種同時(shí)檢測乙型肝炎病毒三種核苷酸類似物耐藥位點(diǎn)的分子試劑盒， 其特征是包括(1)用于PCR反應(yīng)擴(kuò)增的地高辛標(biāo)記的引物，序列是SEQ?NO?1～4； (2)雜交反應(yīng)試劑包括預(yù)雜交液：6×SSC、0.5％SDS和100μG/ML鮭精DNA，雜交 液：6×SSC、0.5％SDS、100μG/ML鮭精DNA和摩爾濃度是3M的四甲基氯化銨，洗 脫液1：2×SSC、0.1％SDS，洗脫液2：0.5×SSC、0.1％SDS，洗脫液3：馬來酸和 氯化鈉，封閉液：0.2％脫脂奶粉和0.1％SDS，偶聯(lián)堿性磷酸酶的地高辛抗體、顯 色緩沖液：0.1M?Tris、0.1M?NaCl，pH9.5的顯色緩沖液，顯色液：NBT/BCIP； (3)雜交用膜條和標(biāo)準(zhǔn)對照品，膜條上點(diǎn)有擴(kuò)增控制探針SEQ?NO?5、顯色控制 探針SEQ?NO?3及27條針對相應(yīng)10個(gè)耐藥位點(diǎn)的特異性探針SEQ?NO?6～32。