[發明專利]混合石蠟、PCR反應試劑的保存方法以及反應試劑盒

有效

• 申請號: 200910190112.7
• 申請日: 2009-09-08
• 公開（公告）號: CN101665816A
• 公開（公告）日: 2010-03-10
• 發明（設計）人: 張鵬;汪再興;吳炳義;彭論;嚴瓊英
• 申請（專利權）人: 深圳市生科源技術有限公司
• 主分類號: C12P19/34
• 分類號: C12P19/34;C12Q1/68
• 代理公司: 深圳中一專利商標事務所
• 代理人: 張全文

1.一種PCR反應試劑的保存方法，PCR反應試劑中含有酶和其他必要成 份，其特征在于，該方法為利用混合石蠟將PCR反應試劑中的酶與其他成份隔 離，所述混合石蠟由液體石蠟和熔化后的固體石蠟均勻混合而成，其中，所述 固體石蠟選自熔點高于50℃的固體石蠟，固體石蠟和液體石蠟的比值為1∶4～1∶ 12(w/v)。

2.如權利要求1所述的PCR反應試劑的保存方法，其特征在于，所述固 體石蠟和液體石蠟的比值為1∶7～1∶9(w/v)。

3.如權利要求1所述的PCR反應試劑的保存方法，其特征在于，所述固 體石蠟為切片石蠟。

4.如權利要求1所述反應試劑的保存方法，其特征在于，所述反應試劑包 括第一反應液和第二反應液，所述第一反應液包括8～15mM的Tris-Cl和 45～55mM的KCl，0.2～0.4mM的dNTPs；2.5～4.0mM的MgCl₂，0.1～0.3μM的 引物，0.2～0.5μM的探針，以及余量滅菌水；第二反應液為所述酶，所述酶為 Taq酶，在反應容器中加入第一反應液后，將所述混合石蠟滅菌且熔化后加入 反應容器，待混合石蠟凝固將反應液覆蓋后，加入第二反應液并將反應容器口 密封。

5.如權利要求4所述PCR反應試劑的保存方法，所述第二反應液中酶還 包括UNG酶。

6.一種PCR反應試劑盒，包括反應容器及置于反應容器中的反應液，所 述反應液包括酶和其他必要成份，其特征在于，所述PCR反應試劑盒中還包括 用于將反應液中酶和其他成分隔離的混合石蠟，所述混合石蠟由液體石蠟和熔 化后的固體石蠟均勻混合而成，其中，所述固體石蠟選自熔點高于50℃的固體 石蠟，固體石蠟和液體石蠟的比值為1∶4～1∶12(w/v)。

7.如權利要求6所述PCR反應試劑盒，其特征在于，所述反應液包括第 一反應液和第二反應液，所述第二反應液為所述酶，所述酶包括Taq酶和UNG 酶。

8.如權利要求6所述PCR反應試劑盒，其特征在于，所述固體石蠟和液 體石蠟的比值為1∶7～1∶9(w/v)。

9.如權利要求6所述PCR反應試劑盒，其特征在于，所述固體石蠟為切 片石蠟。

10.如權利要求7所述PCR反應試劑盒，其特征在于，所述第二反應液 為1～5unit?Taq酶和0.008-0.1unit?UNG酶。

11.如權利要求7所述PCR反應試劑盒，其特征在于，所述第一反應液 包括10mM的Tris-Cl和50mM的KCl，0.25mM的dNTPs，3.5mM的MgCl₂， 0.1μM的引物，0.22μM或0.4μM的探針，以及余量滅菌水。