[發明專利]用于核酸PCR產物直接測序的測序引物和測序方法

有效

• 申請號: 200910189778.0
• 申請日: 2009-08-28
• 公開（公告）號: CN101638691A
• 公開（公告）日: 2010-02-03
• 發明（設計）人: 陸學東
• 申請（專利權）人: 陸學東
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/70;C12N15/11;C12R1/93
• 代理公司: 深圳市博銳專利事務所
• 代理人: 張 明

1.用于核酸PCR產物直接測序的一對測序引物，其特征在于：所 述測序引物的堿基序列分別如SEQ?ID?NO：1和2所示，所述核酸PCR 產物為核酸PCR擴增所得產物，所述核酸PCR擴增所用的擴增引物分別 包括根據目標核酸序列設計的特異性引物序列和位于特異性引物序列 5’端的所述測序引物序列。

2.用于非疾病診斷目的的核酸PCR產物直接測序的測序方法，其 特征在于：包括以下步驟：

1)根據待檢測的目標核酸序列設計并合成一對擴增引物，所述每 條擴增引物包括根據目標核酸序列設計的特異性引物序列和位于特異 性引物序列5’端的測序引物序列，所述位于特異性引物5’端的測序 引物序列分別如SEQ?ID?NO：1和2所示，合成一對測序引物；

2)采用所述擴增引物對待測樣品進行PCR擴增，得到PCR擴增產 物；

3)純化所述PCR擴增產物，得到純化的測序反應模板；

4)用純化的測序反應模板，以所述測序引物進行測序反應，得到 測序反應產物；

5)純化所述測序反應產物；

6)對純化的測序反應產物進行序列測定。

3.根據權利要求2所述的用于核酸PCR產物直接測序的測序方法， 其特征在于，所述步驟3)具體為：PCR擴增產物經瓊脂糖凝膠電泳檢 測后切下待測目標核苷酸目標擴增片段，經凝膠純化試劑盒純化，得到 純化的測序反應模板。