[發明專利]一種提高花葉艷山姜組培繁殖速度的方法

無效

• 申請號: 200910188527.0
• 申請日: 2009-12-01
• 公開（公告）號: CN101785428A
• 公開（公告）日: 2010-07-28
• 發明（設計）人: 陳春滿;張善信;陳青云
• 申請（專利權）人: 東莞市生物技術研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00
• 代理公司: 東莞市冠誠知識產權代理有限公司 44272
• 代理人: 覃業軍

技術領域

本發明涉及花葉艷山姜組培繁殖技術，尤指一種提高花葉艷山姜組培繁殖速度的方 法。

技術背景

花葉艷山姜(Alpinia?zerumbet?cv.Variegata)又稱花葉良姜、斑紋月桃(臺灣)，為姜科山 姜屬姜花的變種，是多年生草本觀葉植物。株高0.6～2m，叢生，葉革質，深綠色中帶有 金黃色縱斑紋，是觀賞價值極高的觀葉、觀花植物，也是各種園林景觀設計中不可缺少的 品種。

花葉艷山姜在自然狀態下雖能結果，但種子播后其后代植株的金黃色葉斑性狀未能遺 傳，因此只能靠自然分根繁衍，但系數甚低，且生長期較長，所以滯后于市場的需要，常 出現供不應求的情況。利用組織培養這一方法，可使繁殖速度大大提高，并能保持其優良 的葉色性狀。但目前有關花葉艷山姜的組織培養的報道很少，且由于花葉艷山姜植物本身 的原因，在實際生產中，花葉艷山姜組培繁殖存在增殖率低，嵌合體分離嚴重，成苗率差 的問題，極大地影響了組培苗工廠化生產的進程，組培苗呈現供不應求的局面，組培苗和 篩苗的價格一直居高不下。

發明內容

本發明旨在克服現有技術的上述不足，提供一種提高花葉艷山姜組培繁殖速度的方 法。其能提高花葉艷山姜的叢芽增殖率，減少嵌合體的分離，提高成苗率。

為此，本發明的技術方案包括如下步驟：

A.采種選擇在連續晴天7～8天后進行，在制種前2～3天從土壤中成叢挖出需要作種 的花葉艷山姜植株，清除泥土，并于室內通風陰涼的地方倒掛著晾干2～3天；

B.選擇塊莖上的側芽或已抽生的嫩芽作為外植體材料；

C.誘導不定芽：

(1)消毒方法：去除塊莖上過長的葉片及根系后，在自來水下沖洗干凈泥土，并將用 作外植體材料的嫩芽與老莖切割開，并用濕脫脂棉花蘸按重量計的0.5％的洗衣粉水輕擦用 作外植體材料的嫩芽和塊莖的表面，再在自來水下沖洗10～20分鐘。在潔凈工作臺上，去 除用作外植體材料的嫩芽上多余的葉片及外苞葉；將塊莖上用作外植體材料的側芽中的大 的側芽切下，小的側芽留在塊莖上，保持每塊外植體材料大小為1～2cm×1～2cm大小。 按照用作外植體材料的嫩芽、用作外植體材料的側芽中的大的側芽及用作外植體材料的側 芽中的小的側芽三種不同類型分置于不同的干凈瓶子中，每瓶3～4個塊材料。用75％酒精 浸泡30s后，用無菌水沖洗一次，再注入0.1％升汞溶液進行浸泡消毒20～25分鐘，材料 小的消毒時間為20分鐘，材料大的消毒時間為25分鐘，并不斷搖動。然后將材料取出， 在無菌水中漂洗5～6次，每次5～6分鐘。后浸入無菌水中備用；

(2)將消毒好的外植體材料切去外苞葉及周圍多余的組織，留下包含生長點的莖尖或 側芽，保持外植體大小為1～1.5cm×1～1.5cm；

(3)將經過上述(2)處理的外植體材料轉入初代誘導芽形成的誘導芽培養基上，每 瓶1個芽，培養容器為250ml的廣口玻璃瓶。所述誘導芽培養基為：MS+6-BA4～5mg·L^-1+KT5.0mg·L^-1+NaH₂PO₄170mg·L^-1+白糖3％+瓊脂0.6％，pH5.8～6.0。6-BA即6-芐 氨基嘌呤；KT即6-糠氨基嘌呤；

(4)培養條件為：光照強度12.5～19μmol·m^-2·s^-1、溫度27～28℃，培養周期30～40 天；

(5)當外植體材料開始啟動時，外植體材料上的側芽開始萌發并伸長。30～40天后， 可產生0.5～2cm長的芽體。這時將外植體材料取出，于潔凈工作臺上切除外植體材料上褐 化的組織塊，去除芽體多余的葉片，保持1～2cm的團塊大??；如果新抽生的芽體基部粗 度大于0.5cm時，用刀尖從上往下切割并刺破到生長點位置，但不使芽體分離；然后轉入 同種培養基中，繼代繁殖3～4次，培養周期30～40天：切割方法如同本條“(5)”中之前 所述，培養容器為250ml的廣口玻璃瓶，每瓶1～6團塊，盡量做到不交叉放置，直到作為 培養體的團塊的基部長出2～4個不定芽，待不定芽生長和增殖較穩定時，轉入增殖培養基 中進行增殖培養。

D.不定芽增殖培養：