[發明專利]大分子膠原蛋白的精制工藝

有效

• 申請號: 200910184481.5
• 申請日: 2009-08-12
• 公開（公告）號: CN101628937A
• 公開（公告）日: 2010-01-20
• 發明（設計）人: 段蕊;張俊杰;今野·久仁彥
• 申請（專利權）人: 江蘇省海洋資源開發研究院
• 主分類號: C07K14/78
• 分類號: C07K14/78;C07K1/34;C07K1/14
• 代理公司: 南京眾聯專利代理有限公司
• 代理人: 劉喜蓮

技術領域

本發明涉及一種蛋白精制工藝，特別是一種大分子膠原蛋白的精制工藝。

背景技術

膠原蛋白是一類在醫用外科、美容充填、護膚品等行業廣泛應用的原材 料。目前我國膠原蛋白生產主以豬、牛等的皮、腱等為原料經過提取工藝得 到大分子膠原蛋白粗品。大分子膠原蛋白粗品需要經過精制才能在醫用外科、 美容充填、護膚品等行業應用。傳統大分子膠原蛋白的精制過程為：在膠原 蛋白粗提液中首先加入Tris至0.01-1.0mol/L，再加入氯化鈉至1.5-3.5 mol/L，鹽析并在低溫或4℃冰箱放置2-48h，后1000-20000rpm冷凍離心機 離心10-100min，得膠原蛋白沉淀；將沉淀溶解在0.1-10mol/L的醋酸中， 重新鹽析1-5次，用0.001-0.1mol/L醋酸透析10-100h，再用蒸餾水透析 10-100h，冷凍干燥得到大分子膠原蛋白。

傳統精制工藝中，首先加入Tris，再加入氯化鈉，緩慢攪拌溶解、需要 消耗大量的Tris和分析純氯化鈉，Tris的價格昂貴，大大增加了精制成本，制 約了大分子膠原蛋白的工業提取過程。

傳統精制工藝中，鹽析后需要低溫冷凍離心的方法得到膠原蛋白沉淀， 設備復雜，能耗高。

傳統精制工藝中，透析過程采用兩步法，先用稀酸溶液，再用蒸餾水的 方法，大分子膠原蛋白透析的過程復雜，工藝操作難度高。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是針對現有技術的不足，提供一種工藝簡單、 可操作性強、成本低的大分子膠原蛋白的精制工藝。

本發明所要解決的技術問題是通過以下的技術方案來實現的。本發明是 一種大分子膠原蛋白的精制工藝，其特征在于，其步驟如下：

(1)向大分子膠原蛋白粗品中加入0℃-30℃的酸性溶液進行溶解，得溶解 液，大分子膠原蛋白粗品與酸性溶液的重量體積比為1∶5-50；或者直 接取0℃-30℃的大分子膠原蛋白酸性提取液作原料，向溶解液或酸性 提取液中加入0℃-30℃、濃度為0.01-2.0mol/L的NaOH溶液，將 其pH值調節到5-12，得膠原蛋白溶液；將膠原蛋白溶液在0℃-30℃ 靜置2-48小時后，取出膠原蛋白溶液上部凝聚的膠原蛋白懸浮層；

(2)將膠原蛋白懸浮層溶解于0℃-30℃的酸性溶液中，膠原蛋白懸浮層與 酸性溶液的重量體積比為1∶5-50，然后按步驟(1)所述的方法調節 pH值、靜置，得膠原蛋白懸浮層；

(3)取膠原蛋白懸浮層用0.05-10mol/L的醋酸溶液溶解，膠原蛋白懸浮層 與醋酸溶液的重量體積比為1∶5-50，然后用蒸餾水直接透析，透析后 將得到的膠原蛋白懸浮液冷凍干燥，得精制大分子膠原蛋白；

所述的酸性溶液為醋酸、檸檬酸或鹽酸溶液。

以上所述的大分子膠原蛋白的精制工藝中：

1、可以重復步驟(2)1-5次，得膠原蛋白懸浮層；

2、在步驟(1)中：向大分子膠原蛋白粗品中加的酸性溶液的溫度優選 為0℃-10℃；大分子膠原蛋白粗品與酸性溶液的重量體積比優選為1∶5-20； 或者直接取0℃-10℃的大分子膠原蛋白酸性提取液作原料；

3、在步驟(1)中：向溶解液或酸性提取液中加入的NaOH溶液的溫度優 選為0℃-10℃、濃度優選為0.5-1.0mol/L，優選將其pH值調節到7-11。

4、在步驟(1)中：靜置時優選將膠原蛋白溶液置于0℃-10℃中，靜 置時間優選為10-36小時；

5、在步驟(2)中：溶解膠原蛋白懸浮層的酸性溶液優選為0℃-10℃， 膠原蛋白懸浮層與酸性溶液的重量體積比優選為1∶5-20。

6、在步驟(3)中：溶解膠原蛋白懸浮層的醋酸溶液的濃度優選為0.1 -5mol/L，膠原蛋白懸浮層與醋酸溶液的重量體積比優選為1∶5-20。

7、本發明工藝適用于對現有技術中所公開的任何一種酸法提取制得的大 分子膠原蛋白粗品進行精制，也適用于對現有技術中公開的任何一種酸法提 取制得的大分子膠原蛋白酸性提取液進行精制。

與現有技術相比，本發明工藝具有以下優點：

1、本發明精制工藝直接在酸性膠原蛋白溶液中加入NaOH溶液調酸度， 從而節省了添加大量Tris、NaCl，使提取費用大大降低；

2、本發明精制工藝中省去了鹽析后膠原蛋白的冷凍離心過程，簡化了工 藝過程，降低了能耗；