[發明專利]防除連作香蕉巴拿馬枯萎病的拮抗菌及其微生物有機肥料

有效

• 申請號: 200910183361.3
• 申請日: 2009-09-18
• 公開（公告）號: CN101659934A
• 公開（公告）日: 2010-03-03
• 發明（設計）人: 沈其榮;何欣;黃啟為;楊興明;沈標
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01P3/00;C05F11/08;C05F17/00;C12R1/125
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.用于防除連作香蕉巴拿馬枯萎病的拮抗菌，為菌株NJN-6和菌株NJN-11，均為枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)，2009年7月9日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，NJN-6菌種保藏號為CGMCC?NO.3183，NJN-11的菌種保藏號為CGMCC?NO.3184；

NJN-6菌株的主要生物學特性為革蘭氏染色陽性G⁺，細胞為桿狀，端生芽孢，兼性厭氧生長，接觸酶陽性、氧化酶陰性、V.P.反應陽性，甲基紅試驗陰性，發酵葡萄糖產酸不產氣，發酵果糖產酸產氣，不發酵木糖、L-阿拉伯糖、甘露醇，可以利用檸檬酸鹽，硝酸還原酶陽性，淀粉水解陽性，明膠水解陽性，分解酪蛋白陽性；

NJN-11菌株的主要生物學特性為革蘭氏染色陽性G⁺，細胞為桿狀，端生芽孢，兼性厭氧生長，接觸酶陽性、氧化酶陰性、V.P.反應陽性，甲基紅試驗陽性，發酵葡萄糖、果糖產酸不產氣，不發酵木糖、L-阿拉伯糖、甘露醇，可以利用檸檬酸鹽，硝酸還原酶陽性，淀粉水解陽性，明膠水解陽性，分解酪蛋白陽性。

2.用權利要求1所述用于防除連作香蕉巴拿馬枯萎病的拮抗菌所生產的微生物有機肥料，該微生物有機肥料中拮抗菌NJN-6和NJN-11含量均達到1×10⁸個/g以上、全氮含量質量比為4～5％，全氮中質量比90％以上為有機氮，總氮磷鉀養分質量比為6～10％、有機質含量質量比為30～35％。

3.權利要求2所述微生物有機肥料的生產方法，其特征為：

(1)將權利要求1所述的拮抗菌NJN-6和NJN-11，分別接種到PDA培養液，進行液體發酵生產，其發酵生產的條件為：pH6.0～7.0，發酵溫度范圍30～35℃，攪拌速度為180～300轉/分鐘，發酵時間為48hr.，發酵液的含菌或芽孢量≥1×10¹⁰個/ml；

(2)分別將NJN-6和NJN-11發酵液按50L/噸的量接種到腐熟的豬糞堆肥和菜粕的微生物分解混合物中進行固體發酵，發酵過程中每天翻堆1次，溫度不超過50℃，發酵5天，發酵結束后拮抗菌NJN-6和NJN-11含量均達到1×10⁸個/g以上，獲得拮抗菌NJN-6的豬糞堆肥固體菌劑、菜粕的微生物分解混合物固體菌劑和NJN-11的兩種固體菌劑。

(3)按豬糞堆肥、菜粕的微生物分解混合物兩類分別將拮抗菌NJN-6固體菌劑和NJN-11固體菌劑以體積比1∶1混合，獲得豬糞堆肥的固體混合菌劑和菜粕微生物分解混合物的固體混合菌劑；

(4)再將豬糞堆肥的固體混合菌劑與菜粕微生物酶解混合物的固體混合菌劑按體積比50-70％∶30-50％的比例充分混合，并后熟2-3天，后熟過程中翻堆2次，最后在溫度不超過60℃的條件下將微生物有機肥的含水量蒸發至30％以下，包裝出廠即為能防治連作香蕉巴拿馬枯萎病的微生物有機肥。

4.根據權利要求3所述微生物有機肥料的生產方法，其中步驟(1)所用PDA培養液配制方法為：

用200g土豆削皮后切成小塊放到水里煮，沸騰后煮30min，接著用四層醫用紗布過濾，濾液加20g普通蔗糖，定容至1000ml，pH值調至7.2-7.4，121℃滅菌20min。

5.根據權利要求3或4所述微生物有機肥料的生產方法，其中步驟(2)所用腐熟的豬糞堆肥發芽指數為98％以上，有機質質量比含量≥35％，有機氮質量比含量為1.2-2％，含水量質量比25-30％。

6.權利要求2所述微生物有機肥料的應用。