[發明專利]一種雞傳染性法氏囊弱毒活疫苗免疫保護劑及其制備方法

有效

• 申請號: 200910180914.X
• 申請日: 2009-10-21
• 公開（公告）號: CN101690821A
• 公開（公告）日: 2010-04-07
• 發明（設計）人: 苗玉和;李尚波;張亞坤;胥桂華;張勇飛;蔣玉文;武潔梅;米宏有;高英杰
• 申請（專利權）人: 遼寧益康生物制品有限公司;張勇飛
• 主分類號: A61K47/42
• 分類號: A61K47/42;A61K47/36;A61K47/26;A61K39/39;A61K36/884;A61K39/12;A61P31/14;C08B37/00
• 代理公司: 北京萬科園知識產權代理有限責任公司 11230
• 代理人: 張亞軍;夏新

技術領域

本發明涉及一種免疫保護劑，具體涉及一種專門針對雞傳染性法氏囊弱毒活疫苗的免疫保護劑，及其制備方法。

背景技術

Morein首次提出免疫刺激復合物(ISCOM)，它是一個全新的免疫佐劑，由皂苷、膽固醇、磷脂等構成的直徑為30-40nm的球形籠狀顆粒(Cox?JC，SjolanderA，Barr?IG.ISCOMs?and?other?saponin?based?adjuvants(J).Adv?Drug?Deiv?Rev，1998，32(3)：247-271)。這種佐劑的特征在于通過皂苷高效地將免疫原遞呈給單核巨噬細胞，為免疫應答奠定了強大的基礎。

傳統免疫佐劑是通過富集免疫原(如鋁膠)、緩釋免疫原(如油乳劑)、激活單核吞噬細胞遞呈抗原(如卡介苗、細菌脂多糖)以及多種綜合作用(如不完全弗氏佐劑和完全弗氏佐劑)來實現對免疫原的強化免疫和改變免疫途徑的佐劑作用。

近年來，中藥免疫佐劑也層出不窮，比如蜂膠免疫佐劑、人參皂苷佐劑(ZL02110578.2)、當歸多糖-內酯復合免疫佐劑(ZL?94115186.7)等等，它們都是利用中藥有效成分激活機體免疫實來現免疫佐劑作用的。

但是，上述免疫佐劑在免疫原的加工制作過程中往往不能有效地保護免疫原的生物活性，特別是弱毒活疫苗類的免疫原，比如對弱毒活菌苗和弱毒活病毒苗的保護，因而只能局限在滅活疫苗類的免疫原中應用。

蛋白保護劑是在弱毒活疫苗類的免疫原干燥加工制作時必須添加的物質，比如氨基酸、葡糖糖、甘露醇、乳糖、蔗糖、白蛋白、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮K30-35等，有時將它們配合在一起組成配方蛋白保護劑，比如：①、牛血清白蛋白10克、谷氨酸鈉0.83克、磷酸二氫鉀0.52克、磷酸氫二鈉1.64克、蔗糖76.62克和無菌去離子水1000毫升，②、聚乙烯吡咯烷酮K30-351克、乳糖10克和無菌去離子水100毫升(王明俊等，獸醫生物品學，中國農業出版社，1997年第1版，345)。這些蛋白保護劑添加到弱毒活疫苗類的免疫原溶液中，利用有限水化膜原理在弱毒活疫苗類的免疫原表面形成水化膜，保護了弱毒活疫苗類的免疫原活性蛋白的的三維立體構象和生物活性；在這類免疫原的干燥過程中，蛋白保護劑分子中的羥基、羧基等與弱毒活疫苗類的免疫原表面分子的官能團以氫鍵方式形成假性水化膜(傅里葉紅外光譜表明，蛋白質和作為穩定劑的糖之間確實存在氫鍵)，保護了弱毒活疫苗類的免疫原的生物活性。但是，蛋白保護劑不具備免疫佐劑的功能。

本發明基于上述技術背景，提出一種新的免疫保護劑，具體是一種特別適用于雞傳染性法氏囊弱毒活疫苗的免疫保護劑，首次發現了中藥歸經、免疫佐劑和蛋白保護劑合三為一的途徑。

發明內容

本發明的目的在于：提供一種新的免疫保護劑，它不僅利用中藥歸經的特點能夠針對具體病原充分激活機體免疫，具有疫苗免疫佐劑作用，而且能夠更加有效的保護免疫原的生物活性，具有免疫原保護作用。

本發明的目的還在于：提供所述免疫保護劑的制備方法。

所述發明目的通過以下技術方案實現：

提供一種雞傳染性法氏囊弱毒活疫苗的免疫保護劑，由以下重量份的組分組成：中藥多糖8份、中藥皂苷1份、酪蛋白1份。

所述的中藥多糖和中藥皂苷均提取自以下重量份的中藥原料：黨參30份、白術20份、豬苓15份、澤瀉15份、茯苓10份、車前草10份。

所述中藥多糖是主要成分，它在水溶液中使免疫原優先水化，在干燥時利用多維網絡空間氫鍵結構使免疫原外表形成假性水化膜，起到蛋白保護劑的作用；在動物體內通過每種中藥多糖特有的歸經方式增強免疫原的免疫效果，起到免疫佐劑作用；

所述中藥皂苷是表面活性分子物質，它們都有親水-親脂的雙親功能，是疫苗保護劑的必須成分；也以特有的歸經方式增強免疫原的免疫效果，起到免疫佐劑作用。

所述酪蛋白具有良好的蛋白保護功能，是常規的蛋白保護劑。

作為中藥多糖和中藥皂苷的來源，本發明所述的中藥原料是運用中藥歸經的理論所選擇的特定中藥，并確定了特定的配比。由于五臟六腑在免疫功能中的作用不同，所以中藥的歸經不同對免疫功能的影響方式也不同。正確地應用中藥歸經理論，組建特異性的中藥方劑是成功制備雞傳染性法氏囊弱毒苗保護劑的大前提，因為它影響著中藥多糖和中藥皂苷的種類。中醫辯證認為雞傳染性法氏囊病是濕熱腎虛證，治法宜清濕熱、補腎氣、以歸腎經的中藥為主藥。本發明采用的中藥中，白術、豬苓、澤瀉、車前草為清濕熱的中藥；黨參為補氣的中藥；豬苓、澤瀉、車前草為歸腎經的中藥。