[發明專利]一種雞傳染性法氏囊弱毒活疫苗免疫保護劑及其制備方法

有效

• 申請號: 200910180914.X
• 申請日: 2009-10-21
• 公開（公告）號: CN101690821A
• 公開（公告）日: 2010-04-07
• 發明（設計）人: 苗玉和;李尚波;張亞坤;胥桂華;張勇飛;蔣玉文;武潔梅;米宏有;高英杰
• 申請（專利權）人: 遼寧益康生物制品有限公司;張勇飛
• 主分類號: A61K47/42
• 分類號: A61K47/42;A61K47/36;A61K47/26;A61K39/39;A61K36/884;A61K39/12;A61P31/14;C08B37/00
• 代理公司: 北京萬科園知識產權代理有限責任公司 11230
• 代理人: 張亞軍;夏新

1.一種雞傳染性法氏囊弱毒活疫苗免疫保護劑，其特征在于：它由以下重量份的組分組成：中藥多糖8份、中藥皂苷1份、酪蛋白1份；

所述的中藥多糖和中藥皂苷均提取自以下重量份的中藥原料：黨參30份、白術20份、豬苓15份、澤瀉15份、茯苓10份、車前草10份。

2.權利要求1所述的雞傳染性法氏囊弱毒活疫苗免疫保護劑，其特征在于，所述的中藥多糖是按照以下方法提取的：

1)按比例取所述中藥原料并將所述中藥原料切碎、洗凈后，用冷水浸泡2小時至藥心充分浸透，再加入原料重量的12倍的水，加熱至沸騰后在90℃的情況下，在熱回流濃縮工藝下煎煮180分鐘同時濃縮得到濃縮藥液；

2)將步驟1)制備的濃縮藥液，再通過10000轉/分離心20分鐘，棄去沉淀物，獲得上清液并經負壓濃縮，使其形成干物質為25％的濃縮藥液；

3)將步驟2)得到的濃縮藥液加4-8倍的95％的乙醇，靜置過夜，棄去乙醇上清液，沉淀物水浴加熱除去乙醇或負壓蒸餾除去乙醇，然后加水溶解并通過100KD濾膜過濾，除去雜蛋白、內毒素等大分子雜質，收集濾過液再通過1KD納濾膜過濾，除去有機小分子和無機分子及離子等雜質，被截留的物質稀釋后逆向水流透析24小時；取出濃縮至少量體積，加5倍量99％乙醇沉淀，攪拌，靜置過夜，3000-5000轉/分離心20分鐘；沉淀物除去乙醇并經過噴霧干燥，即為中藥多糖。

3.權利要求1所述的雞傳染性法氏囊弱毒活疫苗免疫保護劑，其特征在于，所述的中藥皂苷是按照以下方法提取的：

按比例取所述中藥原料，用乙醇或甲醇提取，回收溶劑，取殘渣并用水溶解或混懸制成水溶液，然后再做如下的雙向萃取和純化：

a、往制成的水溶液中加入石油醚或乙醚，將水溶液中的親脂物質色素和油質回收，把中藥皂苷留在水溶液中；

b、往a步制得的水溶液中加入親水性較強的有機溶劑丁醇，溶液中親水性較強的物質繼續留在水溶液中，中藥皂苷轉移到有機溶劑萃取液中，收集有機溶劑萃取液，減壓干燥，制得粗制的中藥皂苷；

c、將b步制得的粗制中藥皂苷溶于乙醇或甲醇中，再逐漸滴加乙醚、丙酮或體積比為1∶1的乙醚-丙酮混合液，至中藥皂苷從溶液中析出為止，取析出的中藥皂苷干燥即可制得中藥皂苷。

4.權利要求1所述的雞傳染性法氏囊弱毒活疫苗免疫保護劑的制備方法，包括以下步驟：將酪蛋白、中藥多糖、中藥皂苷按照所述比例混合，加無菌去?離子水稀釋4～6倍，勻漿，冷凍干燥或噴霧干燥，制成粉劑即為所述的雞傳染性法氏囊弱毒活疫苗保護劑。

5.權利要求1所述的雞傳染性法氏囊弱毒活疫苗免疫保護劑在制備雞傳染性法氏囊弱毒活疫苗中的應用，其特征在于：所述保護劑在制備得到的疫苗中所占的重量比為4％～16％。?