[發明專利]一種制備枯草芽孢桿菌的方法有效
| 申請號: | 200910175148.8 | 申請日: | 2009-09-23 |
| 公開(公告)號: | CN101654665A | 公開(公告)日: | 2010-02-24 |
| 發明(設計)人: | 劉國忠;張潔巖;劉勇;李新 | 申請(專利權)人: | 海南利蒙特生物農藥有限公司 |
| 主分類號: | C12N1/20 | 分類號: | C12N1/20;A01P3/00;C12R1/125 |
| 代理公司: | 北京集佳知識產權代理有限公司 | 代理人: | 逯長明 |
| 地址: | 571924海南*** | 國省代碼: | 海南;66 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 制備 枯草 芽孢 桿菌 方法 | ||
1.一種制備枯草芽孢桿菌的方法,包括以下步驟:
步驟1:將第一液體培養基調pH值為6.5~7.5,高溫滅菌后冷卻至室溫, 接種活化的枯草芽孢桿菌菌種,培養20~40小時,得液體菌種備用,所述第 一液體培養基為馬鈴薯蔗糖培養基或牛肉汁蛋白胨培養基;
步驟2:將第二液體培養基高溫滅菌后冷卻至室溫,按培養基體積的3% 接種步驟1所得液體菌種,攪拌并通氣,在無菌狀態培養24~35小時,得種 子液備用,所述第二液體培養基的配方為玉米粉∶大豆粉∶水的重量比為1∶ 2-3∶150-200,或玉米粉∶大豆粉∶葡萄糖∶水的重量比為1∶2∶1∶200;
步驟3:將麩皮60%-70%、稻草粉20%-30%、玉米粉10%-20%混合均勻配 制成固體培養基,經高溫滅菌后,降溫至室溫,在無菌狀態接種步驟2所得 種子液并進行培養;
步驟4:將步驟3所得培養物在無菌狀態、35℃進行固體發酵培養72~ 90小時,干燥后,即得到本發明所述枯草芽孢桿菌。
2.根據權利要求1所述方法,其特征在于,步驟1至3所述培養的培 養溫度為28℃~30℃。
3.根據權利要求1所述方法,其特征在于,步驟2所述通氣的通氣量為 1∶1~1.5。
4.按照權利要求1所述方法,其特征在于,步驟2中所述接種濃度為 0.6×109個芽孢/毫升。
5.按照權利要求1所述方法,其特征在于,步驟3的接種量為所述培養 基重量的3%~10%。
6.按照權利要求1所述方法,其特征在于,步驟4所述干燥在0℃-50 ℃進行。
7.按照權利要求1所述方法,其特征在于,步驟1-3中所述高溫滅菌為 120~130℃滅菌30-40分鐘。
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