[發明專利]微生物菌種的存活率及活性的檢測方法

無效

• 申請號: 200910174930.8
• 申請日: 2009-11-03
• 公開（公告）號: CN102051404A
• 公開（公告）日: 2011-05-11
• 發明（設計）人: 袁飛;陳穎;徐寶梁;趙貴明;張菲菲;楊海榮;趙勇勝
• 申請（專利權）人: 中國檢驗檢疫科學研究院;袁飛
• 主分類號: C12Q1/06
• 分類號: C12Q1/06;C12R1/42;C12R1/01
• 代理公司: 隆天國際知識產權代理有限公司 72003
• 代理人: 吳小瑛;呂俊清

1.一種微生物菌種的存活率及活性的檢測方法，其包括如下步驟：

A.將微生物菌種溶解在含有噻唑藍的培養液中，并進行稀釋得到菌懸液；

B.將不同稀釋梯度的菌懸液加入到培養板的各孔中；和

C.實時掃描測定，根據掃描結果計算菌種的存活率、判斷菌種的活性。

2.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟A中的培養液為腦心浸液培養液。

3.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟B中的菌懸液的稀釋梯度為10倍梯度。

4.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟C中的存活率是參考大腸菌群最可能數檢索表，確定保存菌種中的活菌數量，再將該活菌數量除以菌種開始保存時的活菌數量，從而得到存活率。

5.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述檢測方法包括以下步驟：

將噻唑藍用PBS配置成5±0.5％的儲備液，滅菌，冰箱保存；將噻唑藍儲備液加入腦心浸液培養液中，使其終濃度達到0.1±0.05％，滅菌，冰箱保存備用；將含有噻唑藍的腦心浸液加入到培養板的各孔中；將菌種用腦心浸液培養液溶解后，用無菌水進行10倍梯度系列稀釋；將各稀釋度的菌懸液加入微孔中；將微孔板放入酶標儀中，將培養溫度設定為36℃，測定波長為520nm，使用動力學測定模式，每隔一段時間測定1次，連續測定一定時間；根據掃描結果計算菌種的存活率、判斷菌種的活性。

6.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述檢測方法包括以下步驟：將噻唑藍用PBS配置成5±0.5％的儲備液，滅菌，4℃冰箱保存；將噻唑藍儲備液加入腦心浸液培養液中，使其終濃度達到0.1±0.05％，滅菌，4℃冰箱保存備用；將含有噻唑藍的腦心浸液加入到96孔培養板的各孔中；將菌種用腦心浸液培養液溶解后，用無菌水進行10倍梯度系列稀釋到10^-8；將10^-1-10^-8稀釋度的菌懸液加入微孔中；將微孔板放入酶標儀中，將培養溫度設定為36℃，測定波長為520nm，使用動力學測定模式，每隔30分鐘測定1次，連續測定24小時；以測定時間為X軸，以吸收值為Y軸，作每孔的時間-吸收曲線；根據曲線判斷菌種活性；參考大腸菌群最可能數檢索表，確定保存菌種中的活菌數量，再將該活菌數量除以菌種開始保存時的活菌數量，得到菌種的存活率。