[發明專利]佐劑系統及疫苗

有效

• 申請號: 200910173165.8
• 申請日: 1999-10-08
• 公開（公告）號: CN101926993A
• 公開（公告）日: 2010-12-29
• 發明（設計）人: N·加康
• 申請（專利權）人: 史密絲克萊恩比徹姆生物有限公司
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61K39/00;A61K39/25;A61K39/245;A61K39/29;A61K39/12;A61K39/095;A61K39/112;A61K39/118;A61K39/36;A61K39/015;A61K39/125;A61K39/14
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 趙蘇林;韋欣華

本申請是申請日為1999年10月8日，申請號為99814341.3的發明名稱為“佐劑系統及疫苗”的發明專利申請的分案申請。?

本發明涉及改進的疫苗、佐劑系統以及制備這樣的疫苗和佐劑系統的方法。具體地說，本發明的疫苗和佐劑系統包括金屬鹽以及其它免疫刺激劑如單磷酰脂質A或其衍生物、Quil?A或其衍生物、或免疫刺激性寡核苷酸如CpG。?

在本領域內，眾所周知鋁鹽提供了具有佐劑活性的安全賦形劑。據認為這些佐劑的作用機制包括形成抗原儲存庫(antigen?depot)以致抗原可以在給予后滯留在注射位點長達3周，以及形成更易被抗原呈遞細胞攝入的抗原/金屬鹽復合物。除鋁外，已經使用其它金屬鹽來吸附抗原，包括鋅鹽、鈣鹽、鈰鹽、鉻鹽、鐵鹽以及鈹鹽。鋁的氫氧化物和磷酸鹽是最常用的。?

包含鋁鹽、抗原以及其它免疫刺激劑的疫苗制劑是本領域內已知的。比起由鋁鹽和抗原單獨刺激的免疫反應，這樣的制劑引起更強烈的免疫反應。這些疫苗制備物的配制以前涉及特殊的生產過程，因為據認為要發生最佳的免疫反應，必須使抗原吸附于免疫刺激劑所吸附的同一鋁鹽顆粒上。這樣，當抗原呈遞細胞攝入抗原時，共吸附的免疫刺激劑直接對同一抗原呈遞細胞施加其刺激作用。?

在EP?0?576?478?B1、EP?0?689?454?B1和EP?0?633?784?B1中描述了基于鋁的疫苗制劑，其中抗原和免疫刺激劑3-脫氧酰化單磷酰脂質A(3-de-O-acylated?monophosphoryl?lipid?A)(3D-MPL)吸附于同一顆粒。在這些情況下，首先使抗原吸附到鋁鹽上，隨后使免疫刺激劑3D-MPL吸附于同一鋁鹽顆粒。這樣的過程首先涉及在水浴中通過超聲處理而懸浮3D-MPL，直到顆粒達到80到500nm之間的大小。一?般在室溫下，在攪拌的同時使抗原吸附在鋁鹽上一小時。然后將所述3D-MPL懸浮物加入已吸附的抗原，并將所述制劑在室溫下溫育1小時，隨后在4℃保存備用。?

從免疫的觀點上看，所述在先技術的配制方法提供了有效的疫苗，但是，它們也包含一些商業缺陷。為使得疫苗適于給予人類，所述方法必須保持一致并服從生產質量管理規范(GMP)控制以及質量控制(QC)。在一些情況下，所述在先技術的方法提供了其中一種抗原或多種抗原全部吸附到同一金屬鹽顆粒上的疫苗。然后3D-MPL要吸附于同一金屬顆粒的要求也使得該方法復雜化。在包含多種抗原的聯合疫苗的情況下，可能是特別成問題的(多種抗原的吸附依賴于每種抗原在特定pH下對特定金屬鹽的親和力)。根據存在何種抗原，所述在先技術的方法可能在重復生產能力和疫苗QC上存在問題。此外，如果在一種特定抗原的QC中發生任何事故或可能導致疫苗污染的事件，這有可能導致所有各個成分的浪費，而不僅僅是出現問題的特定抗原的浪費。另外，在一些情況下，聯合疫苗可能要求順序加入抗原，這樣一個過程是極其耗時并且昂貴的。因此，所述在先技術的方法復雜、不易控制并且昂貴。?

驚人的是，本發明人已經發現不必將抗原和免疫刺激劑吸附于同一顆粒。與本領域內已經接受的觀點不同，已經發現當抗原吸附于從免疫刺激劑結合的那些金屬鹽顆粒分離的特定金屬鹽顆粒上時，可以產生令人滿意的疫苗。?

所述改進過程包括吸附免疫刺激劑到金屬鹽顆粒上，接著使抗原吸附于另一金屬鹽顆粒，隨后混合所述分離的金屬顆粒以形成疫苗。本發明還為佐劑組合物提供了吸附于金屬鹽顆粒的免疫刺激劑，其特征在于所述金屬鹽顆粒基本不含其它抗原。此外，本發明還提供了疫苗，所述疫苗的特征在于免疫刺激劑吸附于基本不含其它抗原的金屬鹽顆粒，并且吸附抗原的金屬鹽顆粒基本不含其它免疫刺激劑。?

因此，本發明提供了包含已經吸附到金屬鹽顆粒上的免疫刺激劑?的佐劑制劑，其特征在于所述組合物基本不含其它抗原。此外，該佐劑制劑是在本發明的生產疫苗的方法中要求的中間體。因此，提供了生產疫苗的方法，所述方法包括將本發明的所述佐劑組合物與抗原混合。所述抗原最好已經預吸附到金屬鹽上。所述金屬鹽可以與吸附所述免疫刺激劑的金屬鹽相同或相似。?

本發明還提供了疫苗組合物，所述組合物包含吸附于第一種金屬鹽顆粒的免疫刺激劑以及吸附于金屬鹽的抗原，其特征在于所述第一種金屬鹽顆粒和所述第二種金屬鹽顆粒是不同的。?