[發明專利]臍帶華通膠來源的間充質干細胞在心力衰竭細胞移植治療中的應用

有效

• 申請號: 200910170248.1
• 申請日: 2009-09-09
• 公開（公告）號: CN101690731A
• 公開（公告）日: 2010-04-07
• 發明（設計）人: 高連如;張寧坤;陳宇;楊曄;丁青艾;朱智明;曹毅
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍海軍總醫院
• 主分類號: A61K35/12
• 分類號: A61K35/12;A61P9/04;C12N5/08
• 代理公司: 北京知本村知識產權代理事務所 11039
• 代理人: 周自清

1.臍帶華通膠源間充質干細胞在制備因冠心病及擴張性心肌病引起的心 力衰竭細胞移植材料中的應用；所述臍帶華通膠源間充質干細胞是按下述方 法制備的：取人新鮮臍帶，以等滲的平衡鹽溶液或無血清培養基洗去臍帶殘留 血液，去除臍動脈、臍靜脈及臍帶外膜，剝離華通膠并剪切成小塊，再以等 滲的平衡鹽溶液或無血清培養液沖洗后，浸泡于0.05-0.3％膠原酶溶液中， 置于35-37.5℃溫箱中10-30小時，組織塊消化，液體呈粘稠狀，然后加入 相當于原液1～10倍量的含胎牛血清的培養基終止消化，分裝于培養瓶或培養 皿，置CO₂培養箱，待細胞貼壁后更換含胎牛血清的培養基溶液，以后每隔2 -4天換液一次，細胞貼壁融合后傳代培養。

2.根據權利要求1所述的臍帶華通膠源間充質干細胞的用途，其特征在 于，所用細胞移植材料為完成2-4代傳代培養的臍帶華通膠間充質干細胞新 鮮品。

3.根據權利要求1所述的臍帶華通膠源間充質干細胞的用途，其特征在 于，所用細胞移植材料為經傳代培養2-4代的臍帶華通膠間充質干細胞冷凍 保存品。

4.根據權利要求3所述的臍帶華通膠源間充質干細胞的用途，其特征在 于，使用冷凍保存的臍帶華通膠間充質干細胞的方法是，從低溫容器中取出 凍存的細胞迅速放入35-38℃溫箱及水浴箱中，2分鐘內溶化，使用完全培 養基溶液重懸細胞，培養2-4天細胞融合后重新消化、洗滌細胞，使用濃度 為“肝素1000單位：0.9％氯化鈉溶液100毫升”的肝素氯化鈉注射液制成 細胞濃度為1-2×10⁶/ml的臍帶華通膠間充質干細胞懸液。