[發明專利]非小細胞肺癌檢測方法及試劑盒

無效

• 申請號: 200910163061.9
• 申請日: 2009-08-21
• 公開（公告）號: CN101993951A
• 公開（公告）日: 2011-03-30
• 發明（設計）人: 馮長訪;趙冬燕;王保君
• 申請（專利權）人: 馮長訪;趙冬燕;王保君
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種基于miRNA的非小細胞肺癌的檢測方法，其特征在于，提取標本中總RNA(含miRNA)，以發卡結構引物在逆轉錄酶的催化下合成cDNA，以miRNA特異性正向引物及通用反向引物進行實時熒光PCR定量檢測標本中特定成熟miRNA的含量，判別是否患有非小細胞肺癌及種類。

2.根據權利要求1所述的方法，所采用的檢測標本包含全血、血清、血漿、唾液、尿液、組織液原液。

3.根據權利要求1所述的方法，反轉錄引物采用的是發卡式結構設計，包含發卡互補區、發卡環狀區和特異性序列區，發卡序列的總長度為20-230nt，其中發卡互補區序列長度為10-100nt，發卡環狀區序列長度為10-100nt，成熟miRNA特異性序列區的序列長度為6-30nt。

4.一種基于miRNA的非小細胞肺癌檢測試劑盒，其特征在于，包含以下組份：(1)發卡結構逆轉錄引物；(2)逆轉錄反應混合物；(3)熒光定量PCR反應混合物；(4)無RNA酶超純水。

5.如權利要求4所述的逆轉錄反應混合物，其特征在于，含有以下任何一種或多種組份的組合：(1)逆轉錄反應緩沖液，(2)dNTPs，(3)RNA酶抑制劑，(4)逆轉錄酶，(5)超純水。

6.如權利要求4所述的熒光定量PCR反應混合物，其特征在于，含有以下任何一種或多種組份的組合：(1)熒光定量PCR緩沖液，(2)DNA聚合酶，(3)熒光染料，(4)dNTPs，(5)正向引物，(6)反向引物，(7)超純水。