[發明專利]一種適用于組織培養基的低酰基結冷膠提取方法

有效

• 申請號: 200910158365.6
• 申請日: 2009-07-09
• 公開（公告）號: CN101591399A
• 公開（公告）日: 2009-12-02
• 發明（設計）人: 吳炳華;朱正學;王雪剛;王佳良;包圣強;沈孝琴
• 申請（專利權）人: 浙江中肯生物科技有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;C12S3/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種適用于組織培養基的低酰基結冷膠的后提取方法，其包括步驟：

(1)發酵液的脫酰基處理：

將發酵液溫度升至80～90℃，加入抗氧化劑，同時加入堿調節pH值 至9.5至11，緩慢攪拌10～15分鐘，然后加入酸，調節pH值至中性，降溫 40℃以下；

(2)發酵液的酶處理：

在步驟(1)發酵液中依次加入不同濃度已經用少量水溶解分散的纖 維素酶、溶菌酶和蛋白酶，并分別維持不同時間，所述蛋白酶為中性蛋白 酶或堿性蛋白酶；

(3)發酵液的絮凝：

在步驟(2)酶處理后的發酵液中，加入鎂、鈣、鋇、鋅、鋁的水溶 性鹽或其組合絮凝，再調節pH值至堿性，固液分離，以除去發酵液中大部 分水以及色素，得到結冷膠粗品；

(4)結冷膠澄清處理：

將步驟(3)得到的結冷膠粗品通過澄清處理，得到澄清的低酰基結 冷膠溶液；

(5)脫酰基結冷膠溶液脫水處理：

在步驟(4)得到的結冷膠脫酰基澄清溶液中，通過加入氯化鉀、氯 化鈉、硫酸鉀、硫酸鈉、氯化鈣、氯化鎂或氯化鐵形成凝膠，固液分離；

(6)離子交換及脫色處理：

將步驟(5)得到的結冷膠切碎成細小顆粒，通過離子交換工藝將結 冷膠中的二價陽離子大部分祛除；稍微壓干后的結冷膠再用低級醇浸泡并 攪拌、過濾以達到徹底脫色效果，其中所述低級醇為乙醇、異丙醇、正丁 醇中的一種或多種；

(7)配入適當質量的螯合劑/酸體系：

在步驟(6)得到的結冷膠中加入適當質量的螯合劑/酸體系以螯合在 結冷膠使用過程中可能額外加入的二價陽離子同時保持pH值的相對穩定， 攪拌均勻；

(8)干燥粉碎：

將步驟(7)中獲得的結冷膠固體物料干燥并粉碎，得到高透明度低 酰基清型結冷膠產品。

2.權利要求1的方法，其中步驟(1)中加入的抗氧化劑為抗壞血酸、異 VC鈉、焦亞硫酸鈉、焦亞硫酸鉀、硫酸氫鉀、半胱氨酸中的一種或多種， 濃度為100～300ppm。

3.權利要求2的方法，其中抗氧化劑的濃度為150～250ppm。

4.權利要求1的方法，其中步驟(1)加入的用于調整pH的堿為NaOH、 KOH、Na₂CO₃、K₂CO₃中的一種或多種。

5.權利要求4的方法，其中步驟(1)加入的用于調整pH的堿為NaOH， KOH中的一種或多種。

6.權利要求4或5的方法，其中步驟(1)加入的用于調整pH的堿為NaOH。

7.權利要求1的方法，其中步驟(1)中使用堿將pH值調節到10。

8.權利要求1的方法，其中步驟(1)中，調整pH的堿應先配成濃度為 10％的溶液。

9.權利要求1的方法，其中步驟(1)中，保持溫度在85～90℃之間。

10.權利要求9的方法，其中步驟(1)中，保持溫度在86～88℃之間。

11.權利要求1的方法，其中步驟(1)中，調整pH的酸為無機酸或有機 酸。

12.權利要求11的方法，其中步驟(1)中，調整pH的酸為無機酸。

13.權利要求11或12的方法，其中無機酸為鹽酸、硫酸、磷酸中的一種 或多種。

14.權利要求13的方法，其中無機酸為鹽酸。

15.權利要求11的方法，其中有機酸為甲酸、醋酸、檸檬酸、蘋果酸、酒 石酸中的一種或多種。

16.權利要求1的方法，其中步驟(1)中，調整pH的酸的用量能將發酵 液體系pH調節到7。

17.權利要求1的方法，其中步驟(1)中，調整pH的酸先配成濃度為10％ 的溶液。