[發(fā)明專利]一種高產(chǎn)聚谷氨酸工程菌株的構(gòu)建方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200910157763.6 | 申請日： | 2009-07-27 |
| 公開（公告）號： | CN101967494A | 公開（公告）日： | 2011-02-09 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 蘇移山;朱希強(qiáng);張曉員;侯重文;郭學(xué)平;凌沛學(xué) | 申請（專利權(quán)）人： | 山東省生物藥物研究院 |
| 主分類號： | C12N15/75 | 分類號： | C12N15/75;C12P13/02;C12R1/125 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 250014 山東省濟(jì)*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 高產(chǎn) 谷氨酸 工程 菌株 構(gòu)建 方法 | ||
1.一種高產(chǎn)聚谷氨酸工程菌株的構(gòu)建方法，其特征在于：將含有啟動(dòng)子、同源重組序列和篩選標(biāo)記的透明顫菌的血紅蛋白基因?qū)毽?聚谷氨酸生產(chǎn)菌細(xì)胞內(nèi)，利用同源重組技術(shù)，將血紅蛋白基因重組到γ-聚谷氨酸生產(chǎn)菌的染色體上，得到含有血紅蛋白基因的重組聚谷氨酸生產(chǎn)菌，其中所述的重組聚谷氨酸生產(chǎn)菌能夠成功表達(dá)血紅蛋白。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的γ-聚谷氨酸生產(chǎn)菌為枯草芽孢桿菌或其他可用來生產(chǎn)γ-聚谷氨酸的菌株。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的γ-聚谷氨酸生產(chǎn)菌為枯草芽孢桿菌。
4.根據(jù)權(quán)利要求書1所述的方法，其特征在于：所述的啟動(dòng)子為P43。
5.根據(jù)權(quán)利要求書1所述的方法，其特征在于：所述的同源重組序列為amyE位點(diǎn)或lacA位點(diǎn)。
6.根據(jù)權(quán)利要求書5所述的方法，其特征在于：所述的同源重組序列為amyE位點(diǎn)。
7.根據(jù)權(quán)利要求書1所述的方法，其特征在于：所述的篩選標(biāo)記為氯霉素抗性基因。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的透明顫菌基因具有GENBANKAceessionNumber為M30794的5′端第142-582位核苷酸序列。
9.權(quán)利要求2或3所述的方法，其特征在于：透明顫菌血紅蛋白基因構(gòu)建枯草芽孢桿菌同源重組載體為pBluescriptsk(+)-amyE-P43-vgb-cat-amyE，又名為pSK-P43-vgb。
10.根據(jù)權(quán)利要求書9所述的方法，其特征在于：所述的重組載體pSK-P43-vgb通過電轉(zhuǎn)化方法導(dǎo)入γ-聚谷氨酸生產(chǎn)菌株內(nèi)。
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