[發明專利]改良多聚核苷酸合成的方法和成分有效
| 申請號： | 200910151168.1 | 申請日： | 2000-09-22 |
| 公開（公告）號： | CN101649307A | 公開（公告）日： | 2010-02-17 |
| 發明（設計）人： | 楊淑偉 | 申請（專利權）人： | 錦可貝基因技術公司 |
| 主分類號： | C12N9/16 | 分類號： | C12N9/16;C12N15/55;C12N15/63;C12N1/21;C12N1/15;C12N5/10;C12Q1/42;C12Q1/68;C12R1/19 |
| 代理公司： | 廣州三環專利代理有限公司 | 代理人： | 劉宇峰 |
| 地址： | 美國馬*** | 國省代碼： | 美國;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 良多 核苷酸 合成 方法 成分 | ||
1.一條分離的多肽，具有熱穩定3′多聚核苷酸磷酸酶活性，所述的多肽的氨基 酸序列如SEQ?ID?NO：6所示。
2.根據權利要求1所述的多肽，其特征在于：為一個獨立的DNA分子編碼。
3.根據權利要求2所述的多肽，其特征在于：所述的一個獨立的DNA分子的核 苷酸序列如SEQ?ID?NO：5所示。
4.一個載體，含有權利要求2中的獨立DNA分子及連接一個可調控的啟動子， 其中DNA分子編碼有熱穩定3′多聚核苷酸磷酸酶活性的多肽。
5.根據權利要求4所述的載體，其特征在于：所述的多肽的氨基酸序列如SEQ?ID NO：6所示。
6.根據權利要求4所述的載體，其特征在于：所述的DNA分子的核苷酸序列如 SEQ?ID?NO：5所示。
7.一個含有權利要求4中表達載體的宿主細胞。
8.一種生產如權利要求1所述的熱穩定3′多聚核苷酸磷酸酶的方法包括：
(a)提供一個含有能夠表達如權利要求1所述的既定磷酸酶的表達載體的重組宿 主；
(b)在能夠表達如權利要求1所述的既定磷酸酶的條件下培養既定宿主。
9.一種檢測蛋白表達的方法，包括：
(1)提供一個表達載體，該載體中含有編碼感興趣蛋白的基因，該基因與權 利要求2中的獨立DNA分子融合；
(2)表達表達載體；以及
(3)檢驗3′磷酸酶活性，存在3′磷酸酶活性表示能成功表達感興趣蛋白。
10.檢測調控元件功能的方法，包括：
(1)提供一個如權利要求4所述的含有編碼熱穩定3′多聚核苷酸磷酸酶基因的表 達載體，該基因與一未知或已知具有調節功能的DNA序列相連接；以及
(2)檢測3′磷酸酶活性，3′磷酸酶活性的表達模式顯示了調控元件調節基因表達 的模式。
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